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绿僵菌(Metarhiziumanisopliae)作为一类重要昆虫病原真菌生防潜力巨大。在自然条件下,绿僵菌主要以孢子控制害虫。孢子成熟时间的长,生产成本高,易受环境的影响,杀虫速度慢等都制约真菌农药的大规模生产及其应用。在高温、营养缺陷等不利条件下,自身能进行微循环产孢。微循环产孢是丝状真菌遇到逆境条件的一种自我保护机制,具有产孢速度快,产孢量大,孢子大小更为均一等优点,但目前该机制的相关基因研究报道尚少。 为了明确微循环产孢的机制,我们课题组在前期构建了绿僵菌微循环产孢时期的均一化全长cDNA文库和微循环产孢时期的差减文库,发现桔霉素生物合成氧化还原酶CtnB基因在上述文库中上调表达。根据绿僵菌全基因组序列克隆得到桔霉素生物合成氧化还原酶基因MaCtnB,并采用基因敲除策略对该基因功能进行研究,主要研究结果如下: ①MaCtnB影响绿僵菌在微循环产孢培养基上的的产孢方式和产孢量,以及影响了绿僵菌在正常培养基上的萌发; ②桔霉素影响了绿僵菌的产孢方式; ③MaCtnB影响绿僵菌对紫外辐射和湿热的敏感性,但不影响细胞壁完整性、抗氧化还原能力以及离子渗透压的耐受性; ④MaCtnB影响绿僵菌的毒力:其机制是绿僵菌在寄主体壁穿透阶段中的萌发、附着胞的形成、膨压有一定影响;但主要在体内定殖阶段,通过影响绿僵菌在寄主体内虫菌体的生长,寄主血细胞的数量以及血细胞的吞噬作用来影响寄主的先天免疫,从而降低了毒力。