凝集素是能够凝集红细胞,与糖蛋白或糖链特异性结合的生物活性肽,其中小分子量凝集素由于低毒性和低免疫原性可作为理想的药物靶向和输送载体。目前,海洋生物及甲壳类动物凝集素报道较多,且大多数分子量大于10KDa,具有免疫原性及毒性,而目前从两栖动物中发现的凝集素极其有限。牛蛙凝集素Catesbeianalectin（CL）是首次从牛蛙皮肤中发现的小分子量的活性多肽,分子量为1.47 KDa,是目前已知的分子量最小的凝集素。前期研究主要侧重于结构、抗菌性及糖基配体等方面的研究,其二级结构为PPⅡ型螺旋,两亲性阳离子多肽,低免疫原性,特异性结合的糖基配体为半乳糖或含有半乳糖基的多糖,为S-型凝集素。但有关牛蛙凝集素CL在动物体内的组织分布与代谢特性及抗肿瘤生物学活性尚未见报道。为研究牛蛙凝集素CL在动物体内的组织代谢与分布规律,为药物的安全评价及其组织靶向性研究提供可靠的实验依据。采用氯胺-T法对多肽合成酪氨酸（Tyr）修饰的牛蛙凝集素CL进行放射性同位素¹²⁵I标记,纯化并进行稳定性的测定。通过尾静脉注射、灌胃、腹腔注射三种方式并于不同时间点动态显像,结合时间-放射性曲线分析,观察在动物体内组织放射性动态分布变化。¹²⁵I-Tyr-CL的标记率为97.3%,放化纯度为99.3%,在体内外模拟实验中具有理想的稳定性和体内组织分布特征。尾静脉注射¹²⁵I-Tyr-CL,肝脏、脾脏和肺脏中放射性含量较高且主要通过肝脏代谢,灌胃及腹腔注射¹²⁵I-Tyr-CL,胃及脾脏中放射性含量较高且主要通过胃组织代谢,三种途径给予¹²⁵I-Tyr-CL后,均不能通过血脑屏障,为牛蛙凝集素CL的药物靶向载体作用研究提供基础。在提高牛蛙凝集素CL的靶向抑制肿瘤作用中,将牛蛙凝集素与Temporin-La及其改造肽Temporin-La1进行偶联设计。同时,RGD肽是一类氨基酸残基的小肽,可促进肿瘤细胞的凋亡,具有靶向性,利用其对比研究了CL的靶向性作用。采用细胞毒性实验,研究了Temporin-La、Temporin-La1（TLa1）、Catesbeianalectin（CL）、CL-La、CL-La1、RGD-La1六种多肽对3种肿瘤细胞（人肝癌细胞株HepG-2、非小细胞肺癌细胞株NCI-H460,鼠源肝癌细胞株Hepa1-6）的抑制活性。细胞毒性实验结果表明,CL细胞毒性较低,抗菌肽及嵌合肽对肿瘤细胞均有杀伤作用且呈浓度依赖性,且对人肝癌细胞株HepG-2的敏感性较高。总之,牛蛙凝集素CL在小鼠体内外具有良好的稳定性和组织分布特征,于肝脏组织中代谢速率快是主要的代谢器官,且静脉注射是较好的给药方式,具有较低的细胞毒性和溶血性。并首次建立了牛蛙凝集素与抗菌肽的偶联,设计双靶向嵌合肽,体外实验证实嵌合肽具有较好的肿瘤细胞杀伤活力。因此,本研究为牛蛙凝集素在药物靶向载体应用方面提供了初步的研究依据。