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目的脑缺血再灌注损伤是一个多种机制参与的病理生理学过程,其中炎症反应在脑缺血再灌注损伤中发挥着重要作用。Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)和 Toll 样受体 2(Toll-like receptor 2,TLR2)是 Toll 样受体(Toll-like receptors,TLRs)家族亚型,在天然免疫和炎症反应中具有重要作用,并可参与缺血性脑损伤的病理过程。本研究旨在探讨TLR4和TLR2在脑缺血再灌注损伤中的作用和机制,为缺血性脑血管病的治疗提供理论依据。方法TLR4对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用:将成年大鼠随机分为假手术组、缺血组和缺血十TAK组(TAK为TLR4拮抗剂)。采用线栓法阻断大鼠右侧大脑中动脉造成脑缺血,缺血1h后缺血组腹腔注射生理盐水,缺血+TAK组腹腔注射TLR4拮抗剂TAK,缺血2h后进行再灌注。各组分别在术后1、3、7、14d取材。各组大鼠术前及术后均采用Zealonga评分法进行神经功能评分。部分大鼠新鲜取材进行Western blotting检测TLR4及其调控因子P-IKKα/β的表达。另一部分大鼠采用生理盐水和4%多聚甲醛经心脏主动脉灌流后取脑组织,进行石蜡包埋、切片、HE染色观察病理学改变。TLR2对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用:将大鼠随机分为假手术组、缺血组和缺血+PAM组(PAM为TLR2激动剂),在缺血30min后,缺血组腹腔注射生理盐水,缺血+PAM组腹腔注射TLR2激动剂PAM3CSK4,其余方法步骤同对TLR4的研究。结果TLR4对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用:(1)神经功能评分结果假手术组、缺血组和缺血+TAK组分别为0分、2.38±0.493分和1.92±0.739分。(2)HE染色结果显示,缺血组和缺血+TAK组缺血侧脑组织均出现不同程度的病理改变,术后1天时缺血+TAK组重于缺血组,其余时间点均为缺血组更严重。(3)TLR4在缺血侧大脑皮质的表达:在所有时间点,假手术组均低于缺血组和缺血+TAK组;术后1和14天,缺血组低于缺血+TAK组;术后3和7天,缺血组高于缺血+TAK组。(4)P-IKKα/β在缺血侧大脑皮质的表达:术后1天时,缺血+ TAK组高于缺血组,其余时间点均为缺血组表达量最高,假手术组表达量较低。TLR2对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用:(1)神经功能评分结果假手术组、缺血组和缺血+PAM组分别为0分、2.49±0.506分和1.52±0.502分。(2)HE染色结果显示,缺血组缺血侧脑组织均出现不同程度的病理改变,且在术后1天时缺血组重于缺血十PAM组。缺血+PAM组其余时间点未见明显病理学改变。(3)TLR2在缺血侧大脑皮质的表达:在所有时间点,缺血组高于假手术组和缺血+PAM组。(4)P-IKKα/β在缺血侧大脑皮质的表达:术后1、3和7天,缺血组高于假手术组和缺血+PAM组;术后14天,缺血+PAM组最高,缺血组最低,但三组之间差异无统计学意义。结论(1)神经功能评分显示假手术组神经功能正常,缺血组神经功能评分最严重。(2)TLR4和TLR2发挥作用的机制可能是由于影响了 P-IKK α/β的表达。(3)TLR4在再灌注1天时可能通过MyD88依赖通路下调P-IKKα/β的表达,减轻脑缺血再灌注损伤,而3天至14天可能通过MyD88依赖通路上调P-IKKα/β的表达,加重脑缺血再灌注损伤。(4)TLR2可能通过MyD88依赖通路下调P-IKKα/β的表达,减轻脑缺血再灌注损伤。