MiR-223在小儿急性淋巴细胞白血病中的表达及对危险度的分级与预后的影响

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目的:miRNA即为小分子RNA,它的靶基因为mRNA分子,其通过碱基互补原则与靶基因的3端非编码区域相互进行作用,该基因长度大概为22个核苷酸左右,该基因为种单链、非编码的基因,介导靶目标miRNA分子的翻译抑制或者切断降解。通过这种转录后基因沉默的方式行使其重要的基因表达调控的功能。目前,相当多的研究发现,人体中有着相当多的miRNA在血液系统方面的肿瘤中起着原癌基因的作用,但是也有相当多的miRNA却起着抑制肿瘤的抑癌基因的作用,在不同的生长发育的阶段,miRNA能够对造血干细胞的生长发育及分化阶段进行调控,同样的miRNA也能够对其它的血细胞进行生长发育及分化阶段调控作用。通过对小儿ALL中表达的miRNA-223的研究,通过考虑miRNA-223在该病中的表达趋势,分析miRNA-223与该疾病的关系,探讨其对危险度分级与预后的影响。方法:本研究选取2012年10月至2013年12月期间在昆明市儿童医院血液科住院治疗的ALL患儿的骨髓血标本。标本总数为44个,整理病例后得到ALL标危(SR)患儿17例,中危(IR)患儿15例,高危(HR)患儿12例,对照组则选取患有特发性血小板减少性紫癜(ITP)儿童20例骨髓标本作为对照组,所有标本均采用实验对象的骨髓血,并提取出其中的总RNA,然后再通过查阅资料获取miRNA-223的基因序列,选取特异性引物,然后再进行cDNA的合成,再利用qRT-PCR对指定的基因miR-223进行分析,将不同分组间获得的循环阈值(Ct)运用2-△Ct的方法计算出miR-223相对表达量再比较不同组间的miRNA-223相对表达量,运用统计学原理进行分析不同分组间的miRNA-223表达是否有差异,并且结合临床资料分析miR-223在ALL的表达及对危险度的分级与预后的影响。结果:通过qRT-PCR的方法,可以观察到miRNA-223在各个组间均有表达,计算出各组的相对表达量后发现在对照儿童中miRNA-223显著高表达,另外在标危组(0.327±0.182)、中危组(0.081±0.013)、高危组(0.039±0.007)中,随着ALL患儿危险度的升高,miRNA-223的表达降低,经过统计学计算分析后,各组间差异均有统计学意义(P<0.05),提示miRNA-223在ALL患儿的危险度分级中有定的提示作用,并且由于患儿危险度的分级涉及化疗方案的选取以及预后,所以也提示了miRNA-223对预后的影响。结论:miRNA-223的相对表达量通过qRT-PCR测得的循环阈值(Ct)进行分析,采用2-△CT’的方法进行分析,△CT’=Ct目的基因-Ct内参基因,所得到的结果提示危险度越高的ALL,其miRNA-223在体内的表达则越低,经过组间对比后它的这种差异性有统计学意义,提示ALL的发病及危险度分级与miRNA-223的表达降低有关,并且提示miRNA-223可能作为种抑癌基因的存在,在机体内发挥其生物作用。
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