纳米金颗粒联合PPD对喉癌Hep-2细胞的细胞毒作用及活体抑瘤作用的探究

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:baobei_jing
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原人参二醇(PPD)为人参提取物中的有效成分,研究证实其具有诱导癌细胞凋亡、抑制癌细胞转移等作用。但其在水中的溶解性差,降低了生物利用率。需要更加合适的制剂增加其生物利用率。纳米材料因被动靶向性、穿透力高、药物负载率高、药物缓释、胞内作用等优点为联合用药及新型药物的研发提供了崭新的平台。纳米金颗粒(Au NPs)由于其中空结构,体积大,薄而坚固的外壳受到广泛关注。采用这些独特的优势,用作药物载体,构建多功能治疗平台。研究目的:将纳米金颗粒及PPD联合应用于抗喉癌治疗的基础性研究,解决PPD溶解性差,生物利用率低的问题。并为纳米金进一步应用于临床治疗提供了新的思路及相关理论及实验数据支持。研究方法:将Hep-2细胞暴露于不同浓度梯度PPD、Au NPs及含Au NPs的不同浓度梯度PPD中培养24小时,MTT法检测并计算细胞相对生长率。原子力显微镜在室温液相接触模式成像扫描空白组、PPD组、Au NPs组及联合组Hep-2细胞。挑选肿瘤体积相近的成瘤裸鼠,随机将其分为对照组、PPD组、Au NPs组及联合组。给予皮下瘤体内注射给药。对照组为生理盐水。剥离肿瘤并称其肿瘤质量。Graph Pad Prism软件统计数据,差异分析采用t-检验或者one-way ANOVA方法。实验结果:较低浓度纳米金颗粒溶胶(5mg/L、10mg/L)对细胞生长无明显作用(P>0.05)。较高浓度的纳米金颗粒(20 mg/L、40 mg/L、80 mg/L)对Hep-2细胞的生长具有抑制作用。10u M浓度的PPD对Hep-2细胞增值具有一定促进作用。PPD浓度升高后(40u M、80u M、160u M),其对Hep-2细胞的生长具有一定抑制作用。联合组与PPD组比较,纳米金颗粒溶胶(10mg/L)搭载的不同PPD浓度的培养基溶液(10u M、20u M、40u M、80u M)对Hep-2细胞的生长抑制作用均强与PPD组(P<0.05),并促使小浓度PPD(10u M、20u M)对Hep-2细胞的生长也具有抑制作用。而搭载160 u M浓度的PPD对Hep-2细胞的生长抑制作用与单纯PPD组相比较无明显差异(P>0.05)。空白对照组和PPD组的Hep-2细胞形态为长梭形,轮廓光滑,细胞丰盈;纳米金颗粒溶胶及联合组暴露的Hep-2细胞表面凹凸不平,胞膜内陷,肉眼观其图像粗糙度有所增加。动物活体抑瘤实验证实,10mg/L纳米金颗粒溶胶组不影响实体肿瘤生长(P>0.05),40u M剂量的PPD具有一定抑瘤效果(P<0.05)。联合组(40u M PPD的10mg/L纳米金颗粒溶胶)抑瘤效果明显(P<0.001)。与相同剂量的PPD组对比,联合组抑瘤效果更加明显(P<0.05)结论:1.纳米金颗粒溶胶浓度低于10mg/L对Hep-2细胞生长无影响,超出此范围浓度后,对Hep-2细胞生长有抑制作用;2.浓度为10u M的PPD促进Hep-2细胞生长,浓度为40u M、80u M、160u M的PPD抑制其生长;3.一定浓度的纳米金颗粒溶胶可以增加Hep-2细胞对PPD的敏感性,可有效降低PPD药物作用浓度,解决PPD水溶性差的问题;4.纳米金颗粒溶胶对Hep-2细胞细胞膜表面结构具有一定作用。
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