论文部分内容阅读
背景类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的基本病理变化是自身免疫异常引起的致炎细胞因子和炎性介质等的释放,以及由此而致的血管炎和滑膜炎。随病情进展可出现滑膜、软骨和骨质的破坏[1]。RA滑膜增生和血管翳的形成,具有类似于“局部恶性肿瘤”的增生性和破坏性的特点,随病情进展可出现滑膜、软骨和骨质的破坏。因此在治疗RA的思路上有不少主张“效仿肿瘤的治疗”方法,抑制滑膜组织增殖、诱导其凋亡成为治疗RA的重要途径。是RA的治疗思路的一个新创新。目的通过观察胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠的症状和血清中炎性细胞因子TNF-α、IL-1水平以及关节滑膜TUNEL染色的凋亡率,比较小剂量、大剂量羟基喜树碱(HCPT)、甲氨蝶呤(MTX)的疗效,得出何种治疗效果更佳,探讨HCPT在类风湿关节炎治疗方面的潜在价值,为进一步研究提供科学依据。方法1.成年Wistar大鼠,多点皮内注射牛Ⅱ型胶原和弗氏完全佐剂混合液,间隔三周腹腔注射加强免疫,诱导关节炎大鼠模型;2.将32只CIA大鼠随机分为4组,分别为B组(模型对照组)、C组(甲氨蝶呤2.0mg/kg/w治疗组)、D组(小剂量羟基喜树碱HCPT0.8mg/kg/w治疗组)、E组(大剂量HCPT2.0mg/kg/w治疗组),另外A组为(空白对照组);3.ELISA法测定不同时点各组大鼠血清IL-1和TNF-α浓度。4.TUNEL凋亡染色15周大鼠的后肢膝关节滑膜,计数比较各组大鼠滑膜细胞凋亡率。5.观察不同时间点各组大鼠踝关节病理改变,并进行病理积分评定。6.应用SPSS11.5统计软件进行统计分析。结果1.模型成功率:根据模型大鼠的症状(包括大体观、关节炎指数、关节肿胀度)及病理学改变来评估。50只接受牛Ⅱ型胶原和弗氏完全佐剂混合液的大鼠,发生对称性多关节炎的大鼠32只,模型成功率64%。2.关节肿胀度评价:初次免疫后关节红肿进行性加重,关节炎指数(AI)与足肿胀度在6周左右达高峰,随着时间的延续肿胀逐渐消退,进入慢性平台期,逐渐出现关节强直、畸形以至功能障碍,导致行动不便。15周内B、C、D、E组AI值与足肿胀度均高于A组(P<0.05),同时C组低于B组(P<0.05); 15周内C、D、E间均无统计学意义(P>0.05)3.血浆TNF-α、IL-1浓度:CIA大鼠与正常大鼠相比,TNF-а、IL-1浓度在6周左右达到高峰后逐渐下降;B、C、D、E组浓度水平均高于A组(P<0.05); C、D、E组均高于B组(P<0.05);C、D、E组间无统计学意义(P>0.05)。各治疗组作用相当。4.15周时点TUNEL染色检测细胞凋亡计数结果:B、C、D、E组凋亡百分比均高于A组(P<0.05); C、D、E组均高于B组(P<0.05);C、D、E组间无统计学意义(P>0.05)。各治疗组作用相当。5.血浆TNF-α、IL-1浓度变化水平与模型鼠足肿胀度趋势相同。结论1. HCPT与MTX相比较,在降低CIA大鼠模型血清IL-1和TNF-α水平、减轻足肿胀度、促进细胞凋亡方面作用相当。2. HCPT在治疗RA方面具有潜在价值。