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第一部分靶向VEGFR2光声/超声双模态造影剂的制备及其特性研究目的制备一种靶向血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的光声/超声双模态高分子造影剂,检测其一般物理性质,体外光致相变效果及相变过程中光声信号的变化情况。方法采用多步乳化法制备载有印度墨水和液态氟碳(PFH)的高分子造影剂;通过碳二亚胺法将抗VEGFR2单克隆抗体与高分子造影剂表面活化的羧基(-COOH)相偶联,制备出靶向VEGFR2高分子造影剂(Vi-PFH-PLGA)。检测其结构,粒径,吸收光谱等一般物理性质,并通过间接免疫荧光法及流式细胞术检测抗体与造影剂的连接情况。考察Vi-PFH-PLGA的体外光致相变情况,近红外光辐照,光学显微镜下观察Vi-PFH-PLGA相变效果,光声成像仪采集其相变过程中光声信号变化情况。结果所制备的靶向高分子造影剂形态规则,呈球形,平均粒径为(565.5±15.6)nm,平均电位为(-15.8±3.21),紫外分光光度计测得Vi-PFH-PLGA在400~900nm处均具有较好的光吸收能力,间接免疫荧光法观察到抗体成功的连接到造影剂表面,且流式细胞仪测得抗体微球连接率为99.72%。Vi-PFH-PLGA溶液经近红外光辐照后,光学显微镜下观察到较多的Vi-PFH-PLGA发生液气相转变产生微泡,光声成像仪检测到其相变过程中可产生较强的光声信号,且信号强度随着时间的变化呈迅速升高后逐渐降低至稳定的趋势。结论成功制备出靶向VEGFR2光声/超声双模态造影剂,其形态规则,分布均匀,抗体连接率高,具备较好的光声学特性和光致相变能力,为后续的体外寻靶及双模态显像实验打下了良好的基础。第二部分靶向VEGFR2光声/超声双模态造影剂的体外寻靶及显影研究目的观察所制备的靶向VEGFR2光声/超声双模态造影剂的体外寻靶能力及光声/超声显影效果。方法制备出Di I标记的靶向VEGFR2光声/超声双模态造影剂(Vi-PFH-PLGA),激光共聚焦显微镜下观察Vi-PFH-PLGA与体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的结合情况,并设置非靶向组及游离抗体封闭组进行对照,评价其体外寻靶能力。采用近红外光辐照靶向造影剂2min后,光声成像仪下采集Vi-PFH-PLGA经近红外光辐照前后的光声、超声及造影模式图,并设置单纯的印度墨水(ink组)和单纯的液态氟碳纳米粒(PFH-PLGA组)进行对照,评价其体外双模态显影效果。结果体外寻靶能力实验显示,激光共聚焦显微镜下可见较多的Vi-PFH-PLGA呈花环状牢固的聚集在人脐静脉内皮细胞HUVEC表面,而非靶向组和抗体干预组未见造影剂与HUVEC的特异性结合。体外光声/超声显影实验显示,Vi-PFH-PLGA可检测到明显的光声信号,经近红外光辐照后其超声信号较辐照之前明显增高(P<0.05),且信号强度明显高于ink组和PFH-PLGA组(P<0.05)。结论靶向VEGFR2光声/超声双模态造影剂与HUVEC细胞具有较强的靶向结合能力并具备较好的光声/超声双模态显影效果,为其在体内的多模态成像乃至靶向光热治疗奠定了了良好的实验基础。