【摘 要】
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目的从肺癌恶性胸腔积液中体外诱导培养树突状细胞(Dendritic cell,DC),通过对其形态、表面分子表达及生物学功能的研究,探讨其在免疫治疗中可能的价值。方法收集15例肺癌患
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目的从肺癌恶性胸腔积液中体外诱导培养树突状细胞(Dendritic cell,DC),通过对其形态、表面分子表达及生物学功能的研究,探讨其在免疫治疗中可能的价值。方法收集15例肺癌患者的恶性胸腔积液,密度梯度离心后贴壁获取DC前体,以GM-CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)、IL-4和TNF-α(肿瘤坏死因子-α)诱导培养,以6例健康志愿者外周血单核细胞来源的DC为对照。倒置显微镜观察形态变化;FITC-Dextran吞噬实验评价其对抗原的摄取能力;流式细胞仪分析诱导培养DC的表型;同种异体混合淋巴细胞反应通过MTT法测定;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测DC培养上清中IL-10和IFN-γ的含量;流式细胞术分析DC刺激后恶性胸腔积液中淋巴细胞表型的变化。MTT法检测DC刺激的胸腔积液中淋巴细胞对肺癌细胞株A549的细胞毒作用。结果(1)体外诱导培养后,恶性胸腔积液中的DC呈典型的树突状形态。(2)诱导d9,高表达HLA-DR(93.4±3.1)%、CD80(87.2±14.8)%、CD86(92.1±2.9)%、CD83(53.8±11.3)%和CD1α(41.4±18.4)%,较培养d6的DC明显升高(P<0.05),为典型成熟DC表型;而正常健康对照DC各表型为HLA-DR(91.6±2.7)%、CD80(91.9±3.9)%、CD86(95.4±2.2)%、CD83(55.9±7.2)%、CD1α(51.2±5.9)%,二者比较无明显差异(P>0.05)。(3)恶性胸腔积液来源的DC以GM-CSF和IL-4诱导培养6天,对FITC-Dextran的摄取率较高,为(76.8±18.8)%,而经TNF-α诱导后摄取率为(25.6±8.4)%,抗原摄取能力明显下降(P<0.05)。(4)混合淋巴细胞反应显示,恶性胸腔积液来源的DC有较强的同种异体淋巴细胞激发能力,刺激指数(stimulation index,SI)在效靶比为1:20时为6.9±1.2,1:10时为8.4±1.5,与正常对照DC相比无明显差异(P>0.05) ,且SI随DC与淋巴细胞比例的增加而增高。(5)成熟DC上清中Th1型细胞因子IFN-γ浓度明显增高(P<0.01),而Th2型细胞因子
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