STI571诱导急性早幼粒白血病细胞株凋亡的实验研究

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目的:初步探讨STI571诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株凋亡机制,为临床应用提供实验依据。方法:1、形态学方法:在倒置显微镜下观察经瑞氏—姬萨姆染色的不同浓度梯度STI571(0.5μm/L,1.0μmol/L,5.0μmol/L)以及联合AS2O3作用于NB4和HL-60不同时间(24h,48h,72h)后,细胞形态的变化。2、MTT法:检测不同浓度梯度的STI571以及AS2O3加不同浓度梯度STI571对NB4、HL-60作用不同时间(24h,48h,72h)后的生长抑制作用。3、采用流式细胞仪检测不同浓度梯度STI571作用于NB4,HL-60于不同时间点(24h,48h,72h)Annexin-V,Fas,Bcl-2,Caspase-3的表达。结果:1、形态学观察:STI571+AS2O3诱导HL-60,NB4细胞于24h出现凋亡小体,48h,72h逐渐增多。MTT法:经统计处理(重复测量设计方差分析,两两之间比较用Q-test)结果显示:STI571诱导HL-60,NB4凋亡作用呈时间依赖性和剂量依赖性。流式结果经统计处理结果显示:①AS2O3对NB4(各时间点AS2O3组与对照组相比,P均<0.05)。AS2O3对HL-60无促凋亡作用(各时间点AS2O3组与对照组相比,P均>0.05)。单用STI571对HL-60,NB4无促凋亡作用(各浓度各时间点STI571组与对照组相比,P均>0.05)。②AS2O3+ STI571(各浓度梯度各时间点)均优于单用AS2O3组(P均<0.05),AS2O3+ STI571(各浓度各时间点)均优于单用STI组(P均<0.05),故AS2O3和STI571有协同作用。③STI571+ AS2O3对NB4细胞株的凋亡作用优于对HL-60细胞株(P<0.05)。结论:STI571能增加AS2O3对HL-60凋亡作用。2、STI571增加AS2O3对NB4细胞促凋亡作用既有时间依赖性又有剂量依赖性。3、STI571+ AS2O3对NB4的促凋亡作用优于对HL-60的促凋亡作用。
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