羟基红花黄色素A的降血压作用及其机制研究

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红花是我国传统的中草药,为菊科植物的干燥花,临床上主要用于冠心病、脑血栓等多种血液循环障碍性疾病的治疗,红花生物活性成分是当前植物药研究和应用的热点之一。羟基红花黄色素 A(HSYA)是从红花中提取到的含量较高的水溶性单体成分,是一种查耳酮葡萄糖苷。研究表明 HSYA 对心肌、脑缺氧缺血有保护作用,也可通过抑制血小板活化因子(PAF)产生和 PAF的作用,抑制血小板黏附、释放,缓解血栓形成和炎症反应等病理变化,减轻了血液循环障碍。有研究表明红花黄色素(SY)能够增加缺血心肌的冠脉流量,起到保护心肌的作用,也有研究者观察到 SY 有降低血压作用,但其作用的具体机制尚不十分明确。本实验观察 HSYA 对自发性高血压大鼠(SHR)血压和离体大鼠胸主动脉环收缩功能的影响,并对其作用机制进行初步探讨。 目的:探讨 HSYA 对大鼠离体胸主动脉环收缩功能和血压的影响及其机制。 方法: 1. 胸主动脉环的张力实验颈椎脱位法处死大鼠,迅速取出胸主动脉,制成 3 mm 长的环形标本,悬挂于充有 10 ml Krebs 溶液的浴槽中,持续通以 95%O2+5%CO2,恒温 37℃。Powerlab生物信号采集分析系统记录血管环张力,动脉收缩的前负荷为2 g,平衡 90 min。血管用 KCl(6×10-2 mol/L)预收缩 3 次以激发血管环活性。用牙签卷少量棉花插入血管轻轻旋转和前后移动以去除内皮,用 1×10-5 mol/L Ach 引起血管舒张反应检验内皮存在与否。在浴槽中加入 HSYA 孵育 20min后,观察对 KCl和 PE 引起血管收缩作用的影响。用 Scott 比值法计算最大收缩张力(Tmax)、达到1/2 Tmax 所需的浓度(EC50)和血管收缩的抑制率〔抑制率=(实验组 Tmax -对照组 Tmax)/对照组 Tmax ×100%〕。 2. 血压测定SHR和 WKY 各 12 只随机分为HSYA组(20 mg/kg)和生理盐水对照组。大鼠给予戊巴比妥钠(40 mg/kg)麻醉后,于颈部正中做 0.7~1.0 cm 切口,分离出右侧颈总动脉,将动脉导管向心脏方向插入 1.5 cm,通过压力换能器与 Powerlab生物信号采集分析系统相连,连续观察大鼠动脉血压变化;左侧股静脉插管给药。 结果: 1. HSYA 对血管收缩功能的影响 (1)HSYA 对 KCl 引起血管收缩张力的影响KCl (6×10-2 mol/L)可使血管发生收缩,产生张力为4.76±0.37 (g)。与对照组相比,在浴槽中加入 HSYA 孵育 20 min后,可浓度依赖性抑制 KCl 引起的血管收缩;当 HSYA为1×10-6、1×10-5和 1×10-4 mol/L时抑制率分别为6.58%、22.88%和 34.34%。这种抑制作用在有内皮组和去内皮组间无差别。 (2)HSYA 对 PE 引起血管收缩张力的影响PE(1×10-9~1×10-4 mol/L)可引起血管呈浓度依赖性收缩。与对照组相比,在浴槽中加入不同浓度 HSYA(1×10-6~1×10-4 mol/L)孵育 20 min后,PE 引起胸主动脉环收缩作用减弱,Tmax 随 HSYA 浓度的增加而减小。PE(1×10-9~1×10-4 mol/L)引起血管收缩的 EC50 在有内皮和去内时分别为1.84×10-5 mol/L和 1.79×10-5 mol/L,统计学无差别。 (3)HSYA对主动脉环CaCl2量-效曲线的影响在无钙 Krebs 溶液中加入PE(1×10-6 mol/L),收缩张力仅 0.68±0.07(g),随着 CaCl2的浓度(1×10-5~3×10-3 mol/L) 增高,血管环收缩张力呈 Ca2+浓度依赖性增大,当CaCl2的浓度为3×10-3 mol/L时,Tmax为4.36±0.24(g)。用 HSYA(1×10-6~1×10-4 mol/L)孵育 20 min后,收缩曲线与对照组相比明显下移,Tmax 减小。当 HSYA 浓度为1×10-5 mol/L和 1×10-4 mol/L时,Tmax 分别为3.32±0.22(g)和 2.98±0.25(g)。 (4)HSYA 对血管作用的机制分析与对照组相比,HSYA(2×10-5 mol/L)组 Tmax和抑制率分别为4.31±0.37(g)和 10.95%,两组间差异显著;HP组 Tmax和抑制率分别为3.53±0.39(g)和 27.07%,HSYA+HP组 Tmax和抑制率3.62±0.41(g)和 25.21%,HP组和 HSYA+HP组与对照组组相比均差异显著;HP组与 HSYA+HP组之间无统计学意义。RR组 Tmax和抑制率分别为3.95±0.41(g)和 19.39%;HSYA+RR组为3.42±0.34(g)和 28.10%,RR组与 HSYA+RR组对照组均差异显著,RR组和 HSYA+RR组间差异显著。 2.HSYA 对 SHR 血压的影响SHR 收缩压和舒张压在给药前分别为168.5±11.4 mm Hg和132.6±9.1 mm Hg,静脉注射 HSYA(20 mg/kg)20 min后收缩压和舒张压开始下降,90 min时血压下降达到最大,收缩压和舒张压分别降到 141.3±10.1 mmHg和112.3±6.9 mm Hg,之后缓慢回升,4 h时基本恢复给药前水平。静脉注射 HSYA 后 WKY 收缩压和舒张压也有下降,但无统计学意义。HSYA 对 SHR和 WKY 心率和心电无影响。 结论:HSYA 可降低 SHR 血压,对 KCl和 PE 引起血管收缩抑制作用可能是通过作用于钙通道和阻断 IP3 受体途径实现的。
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