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茄子黄萎病是茄子的三大病害之一,在我国南北各地均危害严重,目前主要进行化学防治,还没有有效的解决办法。植物内生菌是近十余年来广泛受到重视的一类重要微生物资源,也逐渐成为人们探索进行植物生物防治的新资源。本实验室为了对茄子黄萎病进行生物方面的防治,目前已从茄子内分离出对茄子黄萎病菌有明显拮抗作用的内生细菌,其中29-12的对大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)的拮抗作用最明显,对茄子黄萎病有一定的防治效果,为了进一步探索其生防机制而对29-12在茄子内的内生定殖、防病促生作用开展了本研究。以抗利福平(300μg/mL)和拮抗病原真菌双抗性为标记,用不同的接种方法测定29-12菌株在茄子体内的内生定殖效果及在茄子内的内生定殖动态,结果表明,不同的接种方法土壤灌根、涂抹叶片、茎部针刺等均可使29-12进入茄子内,不同接种方法后菌株均可在植株中的不同部位(根、茎、叶)分离获得,说明29-12菌株可通过叶表、根表及茎表等部位进入体内;此外,通过不同的接种方法测定29-12在茄子内的定殖动态表明,土壤灌根、涂抹叶片、茎部针刺等方法接种后,菌株可主动在茄子内定殖,并迅速向接种点上部、未接种的组织器官转移传导,并可在茄子内定殖很长时间。从回收菌的数量与分离部位看,茎部针刺接种方法不利于29-12内生定殖,土壤灌根接种法有一定的优越性。室内盆钵实验测定菌株29-12不同处理对植物生长作用影响表明,29-12的不同处理菌液、菌体、上清液对茄子的生长影响不同,上清液对茄子有明显的促生长作用,主要表现在根长、株高、干重、鲜重方面,菌液、菌体对茄子没有明显的促进生长作用。室内防病测定表明,29-12菌株的不同处理菌液、菌体、上清液对茄子黄萎病有很好的的预防效果,在接病原菌后第15天,菌液、菌体、上清液对茄子黄萎病的防效分别是100%、60.0%、87.5%,第24天时,防效分别为82.5%、79.07%、22.50%,在接病原菌的前期,上清液较菌体的防病效果好,在接病原菌后期,菌体较上清液的防病效果。生防菌菌体及其胞外分泌物均有防病作用,其胞外分泌物的速效性较好,菌体的持效性较好。防病机制研究表明,菌株分泌抗菌物质抑制病菌菌丝生长、分生孢子的产生和萌发,主动进入植株内生定殖、优先占领病菌入侵位点,从而抑制病原菌的侵入和扩展;降低病害的发生程度。此外,当茄子黄萎病菌侵入茄子后,菌株29-12的不同处理能通过诱导茄子内相关抗病基因的表达,从而增强茄子体内活性氧相关酶如SOD,POD和CAT等的活性变化,以调节茄子内活性氧的代谢平衡,减少茄子内活性氧物质,降低膜脂过氧化程度;同时,菌株29-12的不同处理能迅速增强非活性氧代谢的抗性酶系如PAL酶等的活性,使茄子内生成相应的病程相关(PR)蛋白,作用于植物细胞壁,释放出寡聚糖作为激发寄主释放出主动防御反应的信号,以杀死病菌或限制病菌的扩展,从而使茄子的综合抗病能力得以提高。以上多种因子综合协同作用,是菌株29-12不同处理防治茄子黄萎病的主要机制。