论文部分内容阅读
本论文选取45 kg左右,1-1.5岁,体况良好的杜蒙杂交羯羊15只,随机分为3组,每组5个重复,分别为试验I组(对照组,不含单宁)、试验Ⅱ组(含2%单宁)和试验Ⅲ组(含4%单宁)。本试验以柠条作为饲粮中单宁来源,三组饲粮精粗比均为4:6,按照等能等氮原则进行配置。试验预饲期为14 d,正式试验期为20d.于正试期的18d和19d晨饲前0h和晨饲后6h使用瘤胃液口腔采样器采集瘤胃液,提取微生物DNA,运用实时荧光定量PCR技术检测总细菌、白色瘤胃球菌、黄色瘤胃球菌、产琥珀酸丝状杆菌、溶纤维丁酸弧菌、普雷沃氏菌、牛链球菌、厌氧真菌、产甲烷菌、甲烷短杆菌数量以及mcrA基因表达量;采用16S rRNA高通量测序技术测定晨饲后6 h瘤胃液产甲烷菌和古菌多样性,旨在从瘤胃菌群数量和产甲烷菌多样性的角度探究柠条中单宁影响绵羊瘤胃甲烷生成的作用机理,为柠条等富含单宁饲料资源的开发利用和调控反刍动物生产中温室气体的排放提供科学依据。试验结果表明:(1)晨饲前0h,饲粮中含2%单宁显著降低了黄色瘤胃球菌的数量(P＜0.05),显著增加了普雷沃氏菌的数量(P＜0.05),也降低了总细菌、牛链球菌、溶纤维丁酸弧菌、产甲烷菌和甲烷短杆菌的数量,但统计分析差异不显著(P>0.05)。饲粮中含4%单宁显著降低了总细菌、产甲烷菌、甲烷短杆菌、白色瘤胃球菌、黄色瘤胃球菌、牛链球菌、溶纤维丁酸弧菌和产琥珀酸丝状杆菌数量(P＜0.05),普雷沃氏菌的数量有降低趋势。2%和4%单宁组厌氧真菌数量与对照组相比无显著差异(P＞0.05)。(2)晨饲后6h,饲粮中含2%单宁显著降低了总细菌、白色瘤胃球菌、黄色瘤胃球菌、溶纤维丁酸弧菌、产琥珀酸丝状杆菌的数量(P＜0.05),厌氧真菌、牛链球菌、产甲烷菌和甲烷短杆菌的数量有降低趋势。饲粮中含4%单宁显著降低了总细菌、白色瘤胃球菌、牛链球菌、溶纤维丁酸弧菌、厌氧真菌、产琥珀酸丝状杆菌、产甲烷菌和甲烷短杆菌的数量(P＜0.05),黄色瘤胃球菌的数量有降低的趋势,2%和4%单宁组普雷沃氏菌数量与对照组相比无显著影响(P＞0.05)。(3)晨饲前0h,饲粮中含2%和4%单宁显著降低了绵羊瘤胃mcrA基因表达量(P＜0.05)。晨饲后6h,饲粮中含4%单宁显著降低了绵羊瘤胃mcrA基因(P＜0.05)。(4)晨饲前0h和晨饲后6h,饲粮中含4%单宁显著降低了绵羊瘤胃原虫数量(P＜0.05),饲粮中含2%单宁降低了绵羊瘤胃原虫的数量但统计分析差异不显著(P＞0.05)。(5)饲粮中含4%单宁显著降低了绵羊瘤胃产甲烷菌的菌群丰度和群落多样性(P<0.05)。在门水平上,对照组和2%单宁组优势菌门均为广古菌门,4%单宁组优势菌门为未培养的细菌;在科水平上,对照组和2%单宁组优势菌科均为甲烷杆菌科,4%单宁组优势菌科为未培养的细菌;在属水平上,对照组优势菌属为未培养的细菌,2%和4%单宁组优势菌属均为甲烷短杆菌属。(6)饲粮中含2%和4%单宁显著降低了绵羊瘤胃古菌菌群丰度和群落多样性(P<0.05)。各组优势菌门均为广古菌门,优势菌科为甲烷杆菌科,优势菌属为甲烷短杆菌属。