肿瘤样干细胞Piwi互作RNA的筛选及其在儿童肾母细胞瘤组织中表达情况的实验研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hengheng5251984
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目的:探讨肿瘤样干细胞Piwi互作RNA(piRNA)在儿童肾母细胞瘤中的表达情况和临床意义。方法:对Piwil2重编程人成纤维细胞所形成的肿瘤样干细胞进行高通量测序,筛选出差异表达piRNA,并利用miRanda软件预测其靶基因,对靶基因进行基因功能(GO)分析。采用qRT-PCR检测差异表达piRNA及其靶基因在34例肾母细胞瘤患儿肿瘤组织及正常肾组织标本中的表达,并分析差异表达piRNA及其靶基因与肾母细胞瘤临床病理特征的关系。结果:通过高通量测序筛选出230个差异表达piRNA,利用miRanda软件预测出43个靶基因,经GO分析发现其参与的生物学过程主要为调节细胞钙离子浓度、分子功能主要为参与ATP酶的活动及多聚A尾RNA结合。选取5条未知的差异表达piRNA及其靶基因检测其在肾母细胞瘤肿瘤组织中的表达情况,结果显示第13位未知上调piRNA(NU13)表达量在肿瘤组织中下调(P<0.01),其靶基因NOP56核糖核蛋白(NOP56)表达在肿瘤组织和瘤旁组织中差异表达无统计学意义(P=0.58);第9位未知上调piRNA(NU9)表达量在肿瘤组织中下调(P<0.01),其靶基因40S核糖体蛋白S8(RPS8)基因在肿瘤组织和瘤旁组织中差异表达无统计学意义(P=0.29);第5、7、9位未知下调piRNA(ND5、ND7、ND9)及其共同靶基因MTRNR2样蛋白1(MTRNR2L1)基因的表达量在肿瘤组织中均下调(P<0.01)。以上在儿童肾母细胞瘤组织中出现差异表达的piRNA及其靶基因与患儿年龄、患儿性别、肿瘤分期、病理类型无明显相关性(P>0.05)。结论:piRNA NU9、NU13、ND5、ND7、ND9及靶基因MTRNR2L1在儿童肾母细胞瘤组织中出现差异表达,有望成为鉴别肾母细胞瘤与正常肾组织的标志物。
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