Shewanella oneidensis有氧条件下亚硝酸盐的利用及调控研究

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Shewanella oneidensis作为自然界中广泛存在的一类γ-变形菌门的兼性厌氧菌,其显著的呼吸多样性,引起学术界的广泛关注。鉴于有氧条件下S.oneidensis对亚硝酸盐利用的研究领域空白,以及其在环境修复方面的现实价值,我们对在有氧条件下NO2-还原利用情况以及调控的分子机理进行了深入的研究。主要结果摘要如下:   S.oneidensis MR-1在有氧条件下对亚硝酸盐的利用相比于无氧呼吸,S.oneidensis在有氧条件下表现出对NO2-更高的耐受性。当外源添加的NO2-浓度低于30mM时,S.oneidensis可以生长并利用NO2-,随着NO2-浓度的升高,S.oneidensis菌株的生长受抑制程度加大。有趣的是,在有氧条件下,S.oneidensis对NO2-的利用表现出滞后利用的现象,即当生长进入对数生长后期或平台期后,NO2-才能被利用。NrfA蛋白作为唯一的NO2-末端还原酶,其表达是一个随生长阶段的NO2-诱导表达的过程。过表达NrfA蛋白不足以诱发NO2-在年轻细胞中的初始利用;在对数生长期,电子流通过对末端还原酶及通路的选择而更倾向于氧化还原电势高的电对。除此之外,cymA,menA突变体仍保留了对NO2-的利用能力,该实验现象显示除了从MQ至CymA电子传递通路外,还存在替补的NO2-利用电子传递通路。S.oneidensis MR-1有氧条件下亚硝酸盐利用的调控通路研究   探究了调控蛋白Crp,NarP在有氧条件下对NO2-的调控作用。Crp蛋白,NarQP系统在转录水平上直接调控nrfA基因的表达,进而调控NO2-利用通路。在O2,NO2-存在的条件下,Crp蛋白表现出与生长阶段相关的滞后诱导表达现象,这种滞后现象与NrfA蛋白的滞后诱导表达相一致。△crp菌株表现出区别于其他突变体的对NO2-的低耐受现象。
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