目的观察ERK1/2对高糖环境下足细胞凋亡的作用及来氟米特对其的影响,以进一步探讨来氟米特对DN治疗作用及其可能机制。方法培养的人足细胞分为正常糖组、高渗对照组、高糖组,高糖组按不同刺激时间又分为0.5h、1h、6h、12h、24h五组,应用Western印迹分析法检测各组足细胞ERK1/2信号途径中ERK1/2蛋白活化的变化。足细胞凋亡检测:将足细胞分为高糖对照组、高糖+抑制剂组、高糖+抑制剂+来氟米特(A771726)组、高糖+A771726组,将以上各组足细胞培养24小时后,分别进行ERK1/2信号途径的检测同前及流式细胞仪检测足细胞的凋亡率。结果(1)高糖组30分钟可以活化ERK1/2蛋白,6h开始达高峰,持续活化到24小时开始降至基础水平。正常糖及高渗对照组未能活化ERK1/2。(2)与高糖组相比,ERK1/2蛋白抑制剂(PD98059)抑制了ERK1/2的磷酸化,使磷酸化的ERK1/2( P-ERK1/2)蛋白表达明显减少(P=0.003),从而影响了下游多种核转录因子的活化,影响目的基因的表达而增加了足细胞的凋亡(P=0.001)。(3)A771726可以增加P-ERK1/2的表达量(P=0.002),从而减少足细胞的凋亡(P=0.021)。而PD98059可以影响A771726的作用,使其对足细胞的保护作用减弱,其凋亡率比高糖组明显增加(P=0.006)。结论ERK1/2信号途径参与了来氟米特对足细胞的保护作用。