目的:肿瘤微环境与肿瘤细胞相互作用参与调控肿瘤转移,既往研究认为前梯度蛋白（Anterior gradient-2,AGR2）可被分泌至胞外,在肿瘤微环境中促进结直肠癌（Colorectal cancer,CRC）转移,但是分泌型AGR2在肿瘤微环境中细胞来源及其影响CRC转移的具体分子机制尚不明确。因此,本研究旨在探究分泌型AGR2在肿瘤微环境中细胞来源,以及分泌型AGR2影响CRC转移的具体分子机制。方法:⒈探究分泌型AGR2在肿瘤微环境中细胞来源。⑴收集CRC患者肿瘤组织标本,免疫荧光染色分析AGR2在肿瘤微环境中表达情况;从CRC患者肿瘤组织标本中分离获得肿瘤相关中性粒细胞（Tumor-associated neutrophils,TANs）,检测TANs中AGR2表达和分泌水平。⑵利用结直肠癌组织芯片分析AGR2+TANs浸润（统计AGR2+TANs数目以及AGR2+TANs占总TANs比例）与CRC患者临床特征和预后的关系。⑶建立特异性敲除中性粒细胞Agr2转基因小鼠,构建脾脏注射后切脾的CRC肝转移模型分析TANs分泌AGR2对CRC转移的影响。⑷利用Transwell实验分析重组AGR2蛋白（Recombinant human anterior gradient 2,rAGR2）对CRC细胞迁移的影响;利用鬼笔环肽（F-actin染色）分析rAGR2对CRC细胞细胞骨架重塑的影响（评估细胞应力纤维和丝状伪足数量变化）。⒉探究分泌型AGR2影响CRC转移的具体分子机制。⑴利用液相色谱-质谱联用技术筛选CRC细胞膜上与分泌型AGR2可能结合的相互作用分子;通过免疫共沉淀、免疫荧光进一步筛选与分泌型AGR2相互结合的膜蛋白。⑵通过Transwell实验和F-actin染色分析该相互作用分子在分泌型AGR2影响CRC细胞迁移和细胞骨架重塑中的作用。⑶建立裸鼠尾静脉注射CRC肺转移模型,并腹腔注射rAGR2,分析该受体在分泌型AGR2影响CRC转移中的作用。⑷通过文献调研、RNA-seq、分子生物学实验探究分泌型AGR2调控CRC转移的胞内分子机制。结果:⑴CRC肿瘤微环境中AGR2主要表达于TANs。⑵AGR2+TANs数目增加以及AGR2+TANs占总TANs比例升高均与CRC患者不良预后相关。⑶特异性敲除小鼠中性粒细胞Agr2抑制CRC肝转移。⑷rAGR2在体外促进CRC细胞迁移和细胞骨架重塑（应力纤维和丝状伪足数量增加）。⑸rAGR2与CRC细胞中跨膜蛋白CD98重链（CD98 heavy chain,CD98hc）相互结合。⑹敲除CD98hc抑制rAGR2在体外促进CRC细胞迁移和细胞骨架重塑。⑺敲减CD98hc抑制rAGR2在体内促进CRC肺转移。⑻分泌型AGR2通过CD98hc上调x CT表达,增强x CT转运活性,进而促进谷胱甘肽（Glutathione,GSH）合成,激活Ras同源家族成员A（Ras homolog family member A,Rho A）-Rho A相关蛋白激酶2（Rho-associated kinase 2,ROCK2）通路促进CRC转移。结论:结直肠癌肿瘤微环境中TANs是分泌型AGR2的主要细胞来源,TANs分泌AGR2结合功能性受体CD98hc-x CT,进而激活GSH-Rho A-ROCK2通路促进CRC转移。本研究揭示了肿瘤微环境中TANs分泌AGR2促进CRC转移的分子机制,为防治CRC转移提供了潜在靶标和理论基础。