【摘 要】
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研究目的:外阴阴道假丝酵母菌病（Vulvovaginal candidiasis,VVC）是一种机会性真菌感染,主要由白假丝酵母菌引起,影响大量育龄期妇女的身心健康。目前临床用药以西药为主,且耐药率高。而用于临床的中药屈指可数。中草药甘草查尔酮-A（lichochacone-A）因其抗菌性而被广泛应用于近几年的研究,因此作为治疗VVC的潜在抗真菌药物而备受关注。而全面了解阴道微生态系统对于开发成功
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研究目的:外阴阴道假丝酵母菌病（Vulvovaginal candidiasis,VVC）是一种机会性真菌感染,主要由白假丝酵母菌引起,影响大量育龄期妇女的身心健康。目前临床用药以西药为主,且耐药率高。而用于临床的中药屈指可数。中草药甘草查尔酮-A（lichochacone-A）因其抗菌性而被广泛应用于近几年的研究,因此作为治疗VVC的潜在抗真菌药物而备受关注。而全面了解阴道微生态系统对于开发成功的感染治疗方法至关重要。因此本研究的目的是探讨临床、体外和体内感染白假丝酵母菌后的免疫反应,以及在体内外实验中甘草查尔酮-A对白假丝酵母菌感染期间的免疫调节作用和抗真菌作用。研究方法:1、根据纳入排除标准,收集门诊确诊为VVC的60例患者和60例正常人的阴道分泌物,采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测Th1、Th2、Th17型相关细胞因子（IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4、IL-10、IL-17）的表达水平。2、用甘草查尔酮-A处理白假丝酵母菌感染后VK2/E6E7细胞,并采用ELISA法检测细胞上清中的Th1、Th2、Th17型相关细胞因子（IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4、IL-10、IL-17）的水平。3、采用SD大鼠构建VVC模型,通过革兰氏染色对大鼠阴道分泌物进行微生物学评价并计数真菌菌落,甘草查尔酮-A在体内的抗真菌功效通过苏木精和伊红（Hemotoxylin and eosin staining,HE）染色、透射电子显微镜（Transmisson electron microscopy,TEM）、ELISA法检测Th1、Th2、Th17型相关细胞因子（IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4、IL-10、IL-17）的水平进行评估。研究结果:1、发现VVC组阴道分泌物中Th1、Th17相关细胞因子（IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-17）水平显著低于对照组（P＜0.001）。VVC患者分泌物中Th2相关细胞因子（IL-4、IL-10）的表达浓度在明显高于正常患者（P＜0.0001）。2、白假丝酵母菌与VK2/E6E7共培养,当用甘草查尔酮-A治疗后,感染的VK2/E6E7细胞的Th1、Th17相关细胞因子水平显著上调（IL-2、TNF-α、IFN-γ、IL-17,P＜0.05）。Th2相关细胞因子显著下调（IL-4、IL-10,P＜0.05）。3、建立VVC大鼠模型后,与感染未治疗组相比,甘草查尔酮-A治疗后诱发了Th1、Th17相关细胞因子上调（IL-2、TNF-α、IFN-γ、IL-17,P＜0.05）。Th2相关细胞因子呈下降趋势（IL-4、IL-10,P＜0.05）。透射电子显微镜显示白假丝酵母菌通过诱导内吞作用和主动渗透侵入阴道上皮细胞,甘草查尔酮-A治疗可保护阴道上皮的超微结构。研究结论:外阴阴道假丝酵母菌病是一种复杂的疾病,其症状受宿主生理学、真菌生物学和免疫反应的交叉控制。临床患者、细胞VVC模型和大鼠VVC模型中Th1、Th2、Th17型相关细胞因子（IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4、IL-10、IL-17）的表达水平变化一致;用甘草查尔酮-A干预细胞模型和动物模型后Th1、Th2、Th17型细胞因子（IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4、IL-10、IL-17）水平均有所恢复,且动物模型中的大鼠阴道症状有所缓解,阴道上皮的受损黏膜和超微结构显著改善。
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