论文部分内容阅读
[研究目的] 肝癌是世界上致死率最高的恶性肿瘤之一，我国是世界上肝癌发病人数最多的国家，每年新发病例约占全球45％。Aurora激酶A和B具有抗凋亡、促进增殖与侵袭转移的致癌作用，然而，它们在肝癌中是否存在共表达现象以及共表达在肝癌中的临床意义目前尚不明确。本研究目的在于阐明Aurora A和Aurora B在肝癌中的共表达关系及其临床意义。 [研究方法] 首先，在Oncomine数据库中检索了Aurora激酶A和B在肝癌中的mRNA表达水平，紧接着通过Western Blot检测了它们在24例肝细胞癌组织样本中的表达情况并分析其相关性，并利用免疫组化在141例的肝癌组织中进一步验证。其次，分别统计分析了Aurora A和B的蛋白表达与肝癌预后的关系，以及它们在共表达时与肝癌预后的关系。最后，利用Aurora激酶A和B的抑制剂，通过流式周期和凋亡检测、细胞增殖实验和Western Blot等，对靶向抑制Aurora A和B激酶抑制剂的抗肝癌效应和机制进行分析研究。 [研究结果] 我们研究发现，Aurora A和B在肝癌组织中的高表达呈线性正相关(r=0.8679，P＜0.0001)，其共同高表达是肝癌生存预后的独立危险因素，且该部分肝癌患者的预后最差。SNS-314可以同时抑制AuroraA和B的激酶活性，相对于Aurora、激酶的特异性抑制剂具有更低的IC50及更强的抗肝癌效果。SNS-314可以显著促进肝癌细胞的多倍体(＞4N)形成与凋亡的发生，同时降低肝癌细胞中YAP蛋白表达并促进P21的蛋白堆积，且YAP高表达是肝癌生存的独立危险因素，P21则不然。另外，下调YAP可以促进P21蛋白堆积，而下调P21不仅促进了YAP的堆积，削弱了SNS-314作用下肝癌细胞中的YAP下调程度，还部分拮抗了SNS-314的促肝癌凋亡效应。因此，P21的堆积增强了SNS-314的促肝癌凋亡能力。 [研究结论] 研究结果揭示了在肝癌中存在一个具有致癌作用的信号轴:Aurorakinases/YAP/P21，以及靶向Aurora激酶促肝癌细胞凋亡是通过抑制YAP的功能实现的。我们的研究结果为SNS-314成为肝癌靶向治疗的潜在治疗方式，及其与Hippo信号通路抑制剂的联合抗肝癌治疗方案提供了有力的证据支持。