论文部分内容阅读
目的：本实验运用腭裂畸形动物模型,通过观察牙胚发育过程中Wnt经典通路中重要因子β-catenin的表达,分析其表达变化与牙胚发育的关系,探讨atRA对牙胚发育的影响,为该领域的研究提供实验依据。方法：建立维甲酸诱导C57BL/6J小鼠腭裂畸形动物模型,下午六点C57BL/6J小鼠雌雄2：1合笼,次日早上将阴栓阳性定为E0天。孕鼠随机分为实验组、植物油组、空白组。实验组于E10d一次性灌服100mg/Kg atRA;植物油对照组相同时间灌服等量橄榄油；空白组不予任何处理。E13d、E14d、E16d脱颈处死孕鼠,体视镜下观察,部分样本制备石蜡切片,进行HE染色,确定下颌第一磨牙牙胚发育时期及所在位置,采用免疫组化SABC法和DAB显色法检测p-连环蛋白在E13d、E14d、E16d的牙胚中的表达。结果：(1)蕾状期时,β-catenin在对照组(空白组、植物油组)口腔上皮和牙板上皮中弱阳性表达于胞膜、质、核中,牙蕾末端上皮细胞阳性表达明显,β-catenin在其邻近间充质细胞中有弱阳性表达,外围间充质细胞呈阴性表达。β-catenin在实验组牙胚中呈中度阳性,间充质中为弱阳性或阴性。(2)帽状期时,β-catenin在对照组(空白组、植物油组)口腔上皮中为阳性表达,外釉上皮及星网状层中为弱阳性,内釉上皮呈阳性,原发性釉结处为强阳性,着色于胞膜和胞质；近内釉上皮的牙乳头细胞中见弱阳性表达。牙囊中呈阴性；实验组β-catenin在内釉上皮层为强阳性,外釉上皮层和星网状层则为阳性,牙囊中呈弱阳性表达。(3)钟状期时,β-catenin在对照组(空白组、植物油组)口腔上皮和牙胚中均有表达,阳性表达于外釉上皮,强阳性表达于内釉上皮,星网状层和中间层中呈弱阳性,前成牙本质细胞中见阳性表达,牙囊内为阴性表达；β-catenin在实验组牙胚和口腔上皮中的表达较对照组着色深,牙囊中为阴性。结论：(1)在E13d-E14d-E16d,β-catenin随牙胚发育成熟其表达逐渐增加,尤以内釉上皮和釉结中更强烈,推测p-catenin参与了牙胚发育的调控过程。(2)在atRA诱导腭裂发生过程中,可能通过干扰上皮与间充质之间的相互作用,上调β-catenin在牙胚中的表达,使牙胚发育受阻。