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目的: 明确海马疼痛信号分子在海马艾灸镇痛中的作用。 方法: 选取健康成年C57BL/6J小鼠,清洁级,体重20±2g,随机分为对照组、模型组、模灸组。以完全弗氏佐剂于足底注射诱导形成炎症性疼痛模型。造模后第四天,模灸组给予温和灸干预30min,对照组与模型组给予相同方式捆绑30min。用PL-200热刺痛仪分别测定各组在造模前、造模后第四天(即艾灸干预前)、艾灸后0 min、30 min、60 min、90 min、120min干预后2小时内各时间点的热痛阈值及。治疗结束后处死动物取海马,采用PCR Array高通量检测技术检测炎症痛小鼠海马疼痛信号通路中84种相关信号分子的表达。采用荧光定量PCR技术检测小鼠海马P2X3受体mRNA的表达;统计分析:数据采用SPSS21.0统计软件处理,并用GraphPad Prism6绘制数据图。 结果: 1、艾灸的镇痛作用结果 与对照组比较,模型组造模后以及其他各时间点的痛阈值均显著下降(P<0.01);与模型组比较,模灸组艾灸治疗后30min、60min、90min、120min痛阈值升高,差异均有统计学意义(P<0.05),其中以灸后30min最明显,以后逐渐下降。 2、艾灸后炎症痛小鼠海马疼痛信号通路相关分子的表达 与模型组比较,对照组有16个疼痛信号分子变化明显,其中表达上调的基因有4个:Pla2g1b、Oprm1、Il1b、Tac1,表达下调的基因有12个,如:Mapk1、Penk、Dbh、Htr2a等;与模型组比较,艾灸组有28个疼痛信号分子变化明显,其中表达上调的基因有6个,如:P2X3、Oprm1、P2ry1、Tac1等,下调基因22个,如:Dbh、Mapk14、Htr2a、Mapk1等。在以上基因中,灸后P2X3受体表达显著,灸后P2X3受体上调达倍数为62.6829。 3、艾灸对炎症痛小鼠海马P2X3受体mRNA表达的验证 与对照组比较,模型组小鼠海马P2X3受体mRNA表达统计学上无明显差异(P>0.05);与模型组比较,模灸组经艾灸治疗后,P2X3受体mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论: 1、艾灸对炎症性疼痛具有明确的镇痛作用; 2、海马P2X3、Oprm1、P2ry1、Tac1、Dbh、Mapk14、Htr2a、Mapk1等可能是参与艾灸镇痛的潜在分子靶点。其中,嘌呤信号分子P2X3可能在艾灸镇痛中起重要作用。