论文部分内容阅读
目的本文旨在通过对胃癌组织中自噬相关蛋白(线粒体膜接头受体)FUNDC1和BNIP3表达情况进行研究及分析。首先对线粒体膜接头受体FUNDC1蛋白和BNIP3蛋白分别在胃癌组织和胃癌配对的癌旁正常组织样本中的表达情况是否具有差异进行初步分析,继而对胃癌组织中这两种阳性表达的蛋白分别与临床相关病理指标诸如年龄大小、肿瘤大小、淋巴结转移情况、TNM分期进行分析,分别为探讨FUNDC1蛋白和BNIP3蛋白分别与以上指标的相关性。进而通过我们的实验研究,以希望能在为寻找诊断胃癌的标志物,为治疗胃癌的新型靶向分子药物提供更多的临床基础实验理论依据。方法收集2017年01月至2018年12月兰州大学第二医院通过以手术为主综合性治疗胃癌患者的手术标本80例作为实验组。入选的组织标本,均有完整的临床病理资料及随访资料,年龄30-90岁,平均68岁。将所有选取的组织样本经常规固定液(福尔马林)固定,经包埋、切片、捞片、制片后做免疫组化标记(IHC)。组织切片中肿瘤细胞染色范围的比例以及染色的强度是IHC最后判读的主要依据,对BNIP3、FUNDC1蛋白的表达情况采用半定量打分法进行评估,由兰州大学第二医院的两位经验丰富的病理科(副)主任医师职称阅片打分。统计学处理:采用x~2检验,研究胃癌中BNIP3、FUNDC1蛋白表达的免疫组化情况,对比癌肿和癌旁正常组织是否具有差异;采用Spearman等级相关进行BNIP3和FUNDC1相关性检验及采用Spearman和Pearson等级相关分析BNIP3、FUNDC1分别与患者胃癌病理特征的相关性。所有数据经过统计,三次校对后,使用SPSS16.0进行统计,由流行病统计学专家进行复核,图片均运用Graphpad prism6进行编辑、处理。结果1.BNIP3蛋白和FUNDC1蛋白在胃癌旁正常组织细胞胞浆中浅褐色着色,呈现低表达,而细胞核及细胞膜未见明显表达。线粒体膜接头蛋白BNIP3蛋白和FUNDC1蛋白在胃癌肿组织标本中主要显示于细胞胞浆内,显深褐色,呈高表达状态。2.线粒体膜接头蛋白BNIP3、FUNDC1蛋白在癌肿组织标本及正常的组织标本中的表达经免疫组织化学后显示:在兰州大学第二医院80例胃癌组织中,有53例中膜接头相关蛋白BNIP3呈现高表达状态,高表达率=66.25%。在80例配对胃癌旁的正常组织中,有36例膜接头相关蛋白BNIP3呈现高表达状态,高表达率=45.0%。在胃癌癌组织标本中这种线粒体膜接头蛋白BNIP3的高表达显著高于其配对的癌旁正常组织,在α=0.05的检验水平上,这样的差异具有统计学意义(c~2=5.71,P=0.016);在同样例数的胃癌癌组织中,有59例线粒体膜接头蛋白FUNDC1呈现高表达,高表达率=73.7%。其配对的正常组织样本中,仅有38例膜接头相关蛋白FUNDC1呈高表达,高表达率=47.5%。在癌组织标本中IHC显色的线粒体膜接头FUNDC1蛋白的表达量显著高于其配对的癌旁正常组织样本,在α=0.05的检验水平上,这样的差异具有统计学意义(c~2=11.54,P=0.018)。3.在80例胃癌样本中,BNIP3蛋白、FUNDC1蛋白皆呈高表达状态的共有40例,BNIP3、FUNDC1蛋白都呈阴性表达的有17例,BNIP3蛋白和FUNDC1蛋白的表达具有中等程度相关且呈正相关(r=0.664,P<0.001)。4.在胃癌癌标本组织中,线粒体膜接头相关蛋白BNIP3的高表达与胃癌癌组织实质细胞经淋巴结转移之间的关系呈现出正相关(r=0.226,P=0.013<0.05),具有统计学意义;其线粒体膜接头相关蛋白FUNDC1的高表达与淋巴结的转移也呈正相关,(r=0.308;P=0.006P<0.01)具有统计学意义。结论1、线粒体膜接头蛋白-BNIP3蛋白、FUNDC1蛋白在胃癌肿组织中二者均呈现出高表达的状态。2、在胃癌组织中BNIP3蛋白、FUNDC1蛋白高表达与胃癌细胞经淋巴结的转移密切相关。3、在胃癌组织标本中BNIP3、FUNDC1蛋白阳性的表达关系存在正相关。