绒山羊的被毛由两种不同的毛发组成,短而细的无髓毛和长而粗的有髓毛。无髓毛又名羊绒,由次级毛囊产生,绒的长短、粗细等直接决定羊绒的品质和经济价值。羊绒纤维的形成受多种信号通路、转录因子、角蛋白及其相关蛋白等的影响。转录因子Foxq1是叉头框（Forkhead Box）家族蛋白的一员,参与生物体内DNA修复、胚胎发育和调节代谢平衡等多个生物学过程。本研究结合前期陕北白绒山羊毛囊诱导期和分化期的皮肤组织转录组测序结果,筛选出差异表达基因Foxq1和KAP8,通过构建腺病毒过表达体系,在毛囊干细胞中过表达Foxq1以揭示其对毛囊干细胞的功能,并对其作用机制进行探讨。1.通过分析课题组前期陕北白绒山羊胚胎期65 d和120 d的背部皮肤组织转录组测序数据,筛选出差异表达的Foxq1及KAP8基因,RT-qPCR结果表明Foxq1和KAP8在绒山羊皮肤组织中的表达量显著高于肌肉和心脏等组织,且在胚胎期120 d的表达量显著高于胚胎期65 d,与测序结果相一致。2.构建Foxq1腺病毒过表达体系并成功浸染毛囊干细胞。MTT结果表明,过表达Faxq1后毛囊干细胞的活力显著增强:EdU结果表明过表达Foxq1后阳性细胞数量显著高于对照组;流式细胞周期结果表明,过表达Foxq1后处于S期的细胞数里显著增多;此外,过表达Foxq1能够显著促进抗氧化应激基因CSR和SOD2的表达,抑制凋亡相关基因BCL2的表达。3.通过JASPAR数据库发现KAP8是转录因子Foxql的靶基因,双荧光素酶试验结果表明,KAP8核心启动子序列为KAP8-818,且过表达Foxq1后KAP8基因启动子活性明显降低;RT-qPCR结果显示过表达Foxq1后KAP8表达量下降,以上结果表明Foxql靶向下调KAP8基因的表达。4,通过TRRUST等数据库预测Foxq l的靶基因,并进行GO和KEGG富集分析,发现Foxql靶基因富集到Wnt/β-catcnin信号通路。RT-qPCR结果表明过表达Foxq1可显著促进wnt/β-catenin信号通路关键基因CTNNB1、TCF3、CCND1、c-MYC的表达;免疫荧光结果与RT-qPCR结果一致。本研究阐明了转录因子Foxq1对绒山羊毛囊干细胞增殖的影响,并揭示了 Foxq1与KAP8及Wnt信号通路之间的分子调控机制,研究结果为阐明绒山羊毛囊发生发育过程中的调控机理提供了理论依据。