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目的:体外实验观察不同肝素酶(Heparanase,HPSE)表达水平的肝癌细胞株的粘附、侵袭能力,并探究HPSE对内皮细胞P选择素细胞定位的影响。方法:1、细胞慢病毒转染(Lv):选用肝癌细胞株HepG2作为实验用细胞株,分别予以HPSE过表达及RNAi的慢病毒予以转染,通过qRT-PCR及Western-blot技术检测转染细胞中HPSE基因及其蛋白的表达水平;2、细胞功能实验:分别通过细胞粘附实验,增殖实验,侵袭、迁移实验检测转染细胞的粘附、增殖、侵袭及迁移能力;3、细胞免疫荧光:分别予以人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)与转染细胞进行非接触性共培养,通过细胞免疫荧光观察不同HPSE作用下P选择素在HUVECs中细胞定位;4、ELISA实验:通过ELISA检测非接触性共培养下室培养基中可溶性CD62P的含量。结果:1、qRT-PCR结果:HPSE过表达组中,Lv转染HPSE的Hep G2细胞HPSE mRNA的表达明显高于阴性对照(NC)(P﹤0.05);HPSE RNAi组中,三组Lv转染HPSE的HepG2细胞HPSE mRNA的表达明显低于NC(P﹤0.05);2、Western-blot结果:在HPSE过表达组中,Lv转染HPSE的HepG2细胞HPSE蛋白的表达明显高于NC;HPSE RNAi干扰组中,三组Lv转染HPSE RNAi的HepG2细胞HPSE蛋白表达明显低于NC,且Lv转染HPSE RNAi1 HepG2细胞中HPSE蛋白表达量低于Lv转染HPSE RNAi2、3 HepG2细胞;3、细胞功能实验:HPSE过表达组中,Lv转染HPSE的HepG2的细胞增殖、粘附、侵袭及迁移能力均大于NC,差异有统计学意义(P﹤0.05);HPSE RNAi组中,Lv转染HPSE RNAi的HepG2细胞增殖、粘附、侵袭能力均小于NC,差异有统计学意义(P﹤0.05),但Lv转染HPSE RNAi的HepG2的细胞迁移能力与NC无统计学差异(P﹥0.05);4、细胞免疫荧光实验:在不同HPSE表达水平的转染HepG2作用下,均可见CD62P表达HUVECs胞质中;5、ELISA实验:HPSE过表达组,Lv转染HPSE的HepG2细胞作用下HUVECs培养上清液中可溶性CD62P的含量与NC无统计学意义(P﹥0.05);HPSE RNAi组,Lv转染HPSE RNAi HepG2的细胞作用下HUVECs培养上清液中可溶性CD62P的含量与NC无统计学意义(P﹥0.05)。结论:HPSE过表达及RNAi慢病毒转染HepG2细胞可有效上调及下调HPSE基因及蛋白表达;体外实验HepG2内HPSE表达上调可增加细胞的增殖、粘附、侵袭及迁移能力;HepG2内HPSE表达下调使细胞的增殖、粘附、侵袭能力减弱,但对细胞的迁移能力无影响;不同HPSE表达水平HepG2作用下,CD62P均表达于HUVECs细胞胞质内,但对HUVECs培养上清液中可溶性CD62P的含量无影响。