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[目的]1.观察脑缺血后脊髓颈膨大运动神经元、胶质细胞及炎性因子的变化,探明脑缺血后脊髓神经组织继发的病理变化及机制;2.探究三七皂苷Rg1对脑缺血继发脊髓损伤的保护作用,为防治脑缺血继发脊髓损伤提供理论基础。[方法]本实验用SD雄性大鼠105只,随机分为sham组、脑缺血(MCAO)组、生理盐水(MCAO+NS)组、MCAO+Rg1(40 mg/kg)治疗组四个大组,各大组再根据取材时间分为3d,7d和14d组(n=5)。各组在相应时间灌注处杀后取脊髓颈膨大,应用尼式染色、免疫荧光、免疫组化和Western blot法检测神经元、胶质细胞及炎性因子的变化。应用SPSS 22.0对数据进行单因素方差分析及两两比较,当P<0.05为差异有统计学意义。[结果]1.大鼠永久性脑缺血后,神经元变化如下:尼氏染色显示,sham组脊髓颈膨大前角运动神经元的胞体形态正常,胞质尼氏体分布均匀,MCAO组神经元出现不同程度固缩,尼氏体聚集,以7d组最为严重,MCAO+NS组与MCAO组比较无明显变化,MCAO+Rg1组较MCAO+NS组有所改善;免疫荧光染色显示,sham组TDP-43阳性标记物主要集中在细胞核,MCAO组可在细胞质中看到少量散在分布、大小不均的颗粒状物表达,以7d组最为明显,MCAO+NS组与MCAO组相比没有明显差别,MCAO+Rg1组没有观察到显著的改变;Western blot显示,3d时sham组,MCAO组,MCAO+Rg1组相比较,变化无统计学意义,7d和14 d时MCAO组TDP-43表达水平均明显高于sham组,有统计学意义(P<0.001),Rg1组TDP-43表达比MCAO组降低(P<0.05)。2.星形胶质细胞变化如下:免疫组织化学染色发现,与sham组比较,MCAO组和MCAO+NS组各时间点中颈膨大前角中的GFAP阳性细胞数量明显增加,细胞分支增多,呈激活状态,MCAO+Rg1组与MCAO+NS组比较无明显变化;Western blot显示,与sham组相比,各时间点MCAO组GFAP表达变化无统计学意义(P>0.05),与MCAO组比较,各时间点MCAO+Rg1组GFAP表达变化无统计学意义(P>0.05)。3.小胶质细胞变化如下:免疫组织化学染色显示,与sham组比较,MCAO组各时间点颈膨大前角中的Lectin和Iba-1阳性细胞数量增加,部分细胞胞体略有增大,呈激活状态,MCAO+Rg1组与MCAO+NS组比较,Lectin阳性细胞和Iba-1阳性细胞变化不明显;Western blot显示,与sham组比较,MCAO组各时间点Iba-1蛋白表达增加,有统计学意义(P<0.001),与MCAO组相比,MCAO+Rg1组Iba-1表达下降,具有统计学意义(P<0.01)。4.采用Western blot检测脑缺血后颈膨大中炎性因子变化如下:与sham组相比,MCAO组各时间点iNOS、TNF-α和IL-1β表达水平明显增加,有统计学意义(P<0.05),与MCAO组相比,MCAO+Rg1在各时间点的iNOS、TNF-α和IL-1β表达下降,具有统计学意义(P<0.01)。[结论]1.大鼠永久性脑缺血可诱发脊髓的神经退变、星形胶质细胞和小胶质细胞增生及炎性反应;2.三七皂苷Rg1能改善脊髓继发神经退变、降低炎性反应,进而对脑缺血继发脊髓损伤发挥保护作用。