【摘 要】
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背景与目的:肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)起病隐袭,确诊时通常分期较晚,此时干预效果不佳、预后差,因此寻找肝癌的新型生物学诊断标志物和治疗靶标存在重要意义。本研究旨在探讨着丝粒蛋白M(Centromere Protein-M,CENP-M)在HCC组织中的表达与HCC患者临床特征的相关性及其对HCC患者无进展生存期(Progression-Free Survi
【基金项目】
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福建省科技联合创新资金项目(2019Y9044);
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背景与目的:肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)起病隐袭,确诊时通常分期较晚,此时干预效果不佳、预后差,因此寻找肝癌的新型生物学诊断标志物和治疗靶标存在重要意义。本研究旨在探讨着丝粒蛋白M(Centromere Protein-M,CENP-M)在HCC组织中的表达与HCC患者临床特征的相关性及其对HCC患者无进展生存期(Progression-Free Survival,PFS)的预测价值,并在体外探究CENP-M对HCC细胞功能的影响。方法:本研究第一部分以HCC患者为研究对象,采取前瞻性队列研究,收集50例新鲜肝癌组织、癌旁组织及术后石蜡标本,并收集患者人口学资料、临床病理特征、随访术后PFS获得临床资料。通过免疫组化检测50例HCC患者癌组织及癌旁组织中CENP-M蛋白表达情况,应用统计学方法分析CENP-M蛋白在不同肝脏组织中的表达差异及其与临床病理特征及预后的关系。第二部分通过构建稳转细胞株,进行细胞实验,验证HCC组织中CENP-M的表达情况及其对HCC细胞功能的影响。结果:1、第一部分研究中,1)免疫组化检测显示,肝癌组织和癌旁组织CENP-M蛋白表达水平有统计学差异(?2=30.35,P<0.001);2)对CENP-M蛋白表达情况与临床病理参数进行相关性分析,发现CENP-M表达与肿瘤病理组织学分级相关,差异有统计学意义(P<0.05);进一步通过Kendall’s tau-b相关分析发现,CENP-M表达与病理组织学分级存在一定正相关(相关系数=0.324);3)KaplanMeier生存分析提示CENP-M蛋白表达与否,术后PFS无显著区别(P>0.05);2、第二部分研究中,1)通过基因丰度测定,验证CENP-M在4种肝癌细胞株中均存在表达,以BEL-7404细胞株中表达最显著;2)通过细胞增殖功能实验,发现CENP-M干扰组(sh-CENPM)中G2期细胞/细胞总数的比例大于正常细胞组(NC)、对照组(sh-Scramble)。干扰CENP-M可影响细胞周期,并在体外显著抑制肝癌细胞增殖、促进凋亡;3)通过体外转染乙型肝炎病毒蛋白x(Hepatitis B Virus Protein x,HBx)质粒,验证HBx可以梯度诱导CENP-M表达。结论:1、第一部分研究显示:CENP-M蛋白在肝癌组织中存在差异表达,且与组织学分级存在一定正相关;2、第二部分研究显示:1)CENP-M在多种肝癌细胞株中显著表达;2)CENP-M具有促进肝癌增殖的功能;3)HBx具有促进CENP-M表达的作用,可能协同CENP-M发挥促癌作用。
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