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铜藻(Sargassum horneri),马尾藻属(Sargassum),又名柱囊马尾藻、海柳麦(浙江)、草茜(福建)、竹茜菜(广东),富含藻胶、纤维素、半纤维素、矿物质等,因此被广泛地应用到医药、食品、饲料及有机肥料等方面。在传统医学中,铜藻主要用于治疗用于癭瘤、瘰疬、水肿、脚气浮肿、甲状腺肿及颈淋巴结肿等疾病。本研究采用铜藻全株为原料,经粉碎、95%酒精脱脂处理、经微波辅助提取、乙醇分级沉淀得到SHPS30、SHPS60和SHPS80三个铜藻粗多糖组分,并对其抗氧化活性进行了研究,包括羟基自由基清除活性、DPPH自由基清除活性、超氧阴离子自由基清除活性、ABTS自由基清除活性及总还原力,实验表明,三者均具有一定的抗氧化活性。其中微波辅助提取工艺采用单因素结合响应面优化方法,得出最佳提取工艺为提取温度72℃,提取时间39 min,液料比65:1 mL/g。在此条件下进行实验,所测得的铜藻多糖提取率达到12.02%(n=3)。同时,根据方差分析,得出因素的主效应关系为:水料比>提取温度>提取时间。以SHPS60组分作为进一步分离纯化的研究对象,采用A103S大孔树脂对SHPS60进行脱色脱蛋白,然后经DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱和Sephadex G-25凝胶柱层析分离后得到SHPSA单一组分。本研究采用MTT试验及流式细胞术考察SHPSA对人结肠癌DLD-1细胞的生长抑制作用及对其细胞凋亡和细胞周期的影响。实验结果表明,随SHPSA浓度增加,其对DLD-1生长抑制作用增强,其对DLD-1生长的半抑制浓度(IC50)约为1.0 mg/mL。流式细胞术检测表明SHPSA可以引起DLD-1细胞凋亡;SHPSA在一定程度上引起了 DLD-1细胞的凋亡及细胞周期时相分布的变化,将大部分细胞阻滞在G2/M期,从而抑制DLD-1细胞的增殖。经HPLC分析得SHPSA的平均分子量为5.78×105 Da;红外分析表明SHPSA为不含糖醛酸的中性多糖;乙酰化结合GC-MS分析表明SHPSA的单糖组成只有葡萄糖;甲基化结合GC-MS分析表明SHPSA的糖残基分别为端基葡萄糖残基、1,3连接葡萄糖残基、1,6连接葡萄糖残基和1,3,6连接葡萄糖残基;结合SHPSA的一维和二维核磁图谱分析,推断SHPSA的大致结构如下: