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目的：采用左侧大脑中动脉闭塞法(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)建立小鼠脑缺血再灌注损伤模型；观察小鼠脑缺血再灌注损伤早期脑组织TLR4、MyD88、VEGF-A、IL-10、TGF-β1表达变化,脾组织TLR4、VEGF-A、IL-10、TGF-β1、Treg细胞表达变化,胸腺组织TLR4表达变化,同时观察白蛋白或氯化锌干预对这些炎症因子有何影响。首先,明确小鼠脑缺血再灌注损伤早期诱导的免疫炎症反应如何变化；其次,从免疫视角,探讨白蛋白发挥脑保护作用的分子机制；再者,研究氯化锌在小鼠脑缺血再灌注损伤中的作用及氯化锌对脑缺血中TLR4表达有何影响。方法：(一)白蛋白处理脑缺血再灌注损伤小鼠1.采用五点法,评价小鼠脑缺血再灌注24h神经功能缺陷情况。2.采用溴甲酚绿比色法,检测小鼠脑缺血再灌注6h、24h血清白蛋白水平。3.采用PCR法,检测小鼠脑缺血再灌注6h、24h脑组织TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、VEGF-A mRNA、IL-10 mRNA、TGF-β1 mRNA表达水平。4.采用PCR法,检测小鼠脑缺血再灌注6h、24h脾组织TLR4 mRNA、VEGF-A mRNA、IL-10 mRNA、TGF-β1 mRNA表达水平5.采用PCR法,检测小鼠脑缺血再灌注6h、24h胸腺组织TLR4 mRNA表达水平。6.采用免疫组织化学法,检测小鼠脑缺血再灌注24h脑组织、脾组织、胸腺组织TLR4蛋白表达水平。7.采用流式细胞技术,检测小鼠脑缺血再灌注24h脾组织中四群T细胞水平。(二)氯化锌处理脑缺血再灌注损伤小鼠1.采用五点法,评价小鼠脑缺血再灌注24h神经功能缺陷情况。2.采用PCR法,检测小鼠脑缺血再灌注6h、24h脑组织TLR4 mRNA、MyD88 mRNA表达水平。3.采用免疫组织化学法,检测小鼠脑缺血再灌注24h脑组织、脾组织、胸腺组织TLR4蛋白表达水平。4.采用流式细胞技术,检测小鼠脑缺血再灌注24h脾组织中四群T细胞水平。结果：(一)白蛋白处理脑缺血再灌注损伤小鼠1.脑缺血再灌注24h白蛋白明显改善了小鼠神经功能缺陷评分(P<0.01)。2.脑缺血再灌注6h、24h,与假手术组比较,生理盐水组小鼠血清白蛋白水平降低(P<0.01),白蛋白组小鼠血清白蛋白水平升高(P<0.01),与生理盐水组比较,白蛋白组血清白蛋白水平明显升高(P<0.01)。3.脑缺血再灌注6h、24h,与假手术组比较,生理盐水组与白蛋白组小鼠脑组织TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、VEGF-A mRNA、IL-10 mRNA、TGF-β1 mRNA的表达水平均升高(P<0.01),与生理盐水组比较,白蛋白组脑组织TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、VEGF-AmRNA表达水平降低(p<0.01),IL-10 mRNA、TGF-β1mRNA表达水平升高(P<0.01)。4.脑缺血再灌注6h、24h,与假手术组比较,生理盐水组与白蛋白组小鼠脾组织TLR4 mRNA、VEGF-A mRNA、IL-10 mRNA、TGF-β1 mRNA的表达水平均升高(p<0.01),与生理盐水组比较,白蛋白组脾组织TLR4 mRNA、VEGF-A mRNA表达水平降低(p<0.01),IL-10 mRNA、TGF-β1 mRNA表达水平升高(P<0.01)。5.脑缺血再灌注6h、24h,与假手术组比较,生理盐水组与白蛋白组小鼠胸腺组织TLR4 mRNA的表达水平升高(P<0.01),与生理盐水组比较,白蛋白组胸腺组织TLR4 mRNA的表达水平降低(P<0.01)。6.脑缺血再灌注24h,与假手术组比较,生理盐水组小鼠脑组织、脾组织、胸腺组织TLR4蛋白表达呈强阳性,与生理盐水组比较,白蛋白组脑组织、脾组织、胸腺组织TLR4蛋白表达较弱。7.脑缺血再灌注24h,对于脾组织中CD4+CD25-FoxP3+T细胞,生理盐水组与假手术组比较,差异无统计学意义(p>0.05),白蛋白组与假手术组比较,水平明显升高(p<0.01),白蛋白组与生理盐水组比较,水平升高(p<0.05)。对于脾组织中CD4+CD25-FoxP3-T细胞,与假手术组比较,生理盐水组和白蛋白组水平明显降低(P<0.01),白蛋白组与生理盐水组比较,水平明显降低(P<0.01)。对于脾组织中CD4+CD25+FoxP3+T(调节T)细胞,与假手术组比较,生理盐水组与白蛋白组水平明显升高(P<0.01),与生理盐水组比较,白蛋白组水平亦明显升高(p<0.01)。对于脾组织中CD4+CD25+FoxP3-T细胞,与假手术组比较,生理盐水组与白蛋白组水平明显升高(p<0.01),而白蛋白组与生理盐水组比较,水平亦明显升高(<0.01)。(二)氯化锌处理脑缺血再灌注损伤小鼠1.脑缺血再灌注24h氯化锌明显改善了脑缺血小鼠神经功能缺陷(p<0.01)。2.脑缺血再灌注6h、24h,与假手术组比较,生理盐水组与氯化锌组小鼠脑组织TLR4、MyD88 mRNA表达水平升高(p<O.05),与生理盐水组比较,氯化锌组脑组织TLR4、MyD88 mRNA表达没有明显变化(p>0.05)。3.脑缺血再灌注24h,与假手术组比较,生理盐水组与氯化锌组小鼠脑组织、脾组织、胸腺组织TLR4蛋白表达呈强阳性,与生理盐水组比较,氯化锌组小鼠脑组织、脾组织、胸腺组织TLR4蛋白表达无明显差异。4.脑缺血再灌注24h,对于脾组织中CD4+CD25-FoxP3+T细胞,假手术组、生理盐水组、氯化锌组三组之间比较,差异无统计学意义(p>0.05)。对于脾组织中CD4+CD25-FoxP3-T细胞,与假手术组比较,生理盐水组和氯化锌组水平明显降低(p<0.01)；与生理盐水组比较,氯化锌组水平明显升高(p<0.05)。对于脾组织中CD4+CD25+FoxP3+T(调节T)细胞,与假手术组比较,生理盐水组与氯化锌组水平明显升高(P<0.01),氯化锌组与生理盐水组比较,差异无统计学意义(p>0.05)。对于脾组织中CD4+CD25+FoxP3-T细胞,与假手术组比较,生理盐水组与氯化锌组水平明显升高(P<0.01),而氯化锌组与生理盐水组比较,差异无统计学意(p>0.05)。结论：脑缺血再灌注后6h、24h,脑、脾、胸腺组织TLR4信号被激活,脑、脾组织炎症因子VEGF-A、抗炎因子IL-10、TGF-β1及脾组织中Treg细胞水平均升高；白蛋白处理,可抑制脑、脾、胸腺组织TLR4表达,降低脑、脾组织VEGF-A水平,增强脑、脾组织IL-10、TGF-β1及脾组织Treg细胞水平,改善了脑缺血小鼠神经功能缺陷,揭示白蛋白可能通过干预脑缺血后免疫炎症反应,发挥脑保护作用；氯化锌处理,没有引起脑、脾、胸腺组织TLR4表达变化,但氯化锌改善了脑缺血小鼠神经功能缺陷。