论文部分内容阅读
目的：
本课题建立顺铂(cisplatin,DDP)诱导的小鼠肝脏损伤模型，经过针刺、艾灸干预后，观察顺铂诱导的小鼠肝脏组织的形态学改变以及肝脏组织中还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、过氧化脂质(LPO)、髓过氧化物酶(MPO)含量的变化。阐明针灸修复顺铂诱导的小鼠肝脏损伤的作用及机理。
方法：
选取40只昆明种雄性清洁级小鼠，7周龄，体重20±2g，随机分成4组，每组各10只，即空白组(A)，模型组(B)，针刺组(C)，艾灸组(D)。在前期研究基础上，空白组按照10mg/kg腹腔注射0.9％Nacl溶液(注射1次)，其余3组分别按照剂量10mg/kg腹腔注射DDP(注射1次)，24小时后模型成功。造模24小时之后从每组分别随机选取1只小鼠处死，做肝脏病理学切片观察，以验证顺铂致肝损伤模型成功。依据各组小鼠腹腔注射药物的先后顺序，依次在每天的同时间段进行一定的干预，分别是A、B组的小鼠依次进行陪同固定，每天1次，连续5天；C、D组的小鼠则选取“大椎”、“肝俞”、“肾俞”、“足三里”，固定人员对其分别进行针刺、艾灸，每天1次，连续5天。治疗结束，次日取材，取出肝脏称重，将小鼠的肝左叶用4%的多聚甲醛固定，待做病理切片用；将小鼠的肝右叶取出并放置于-80℃冰箱保存留用，以待用酶联免疫吸附实验方法(ELISA)检测小鼠肝脏组织中GSH、GSH-px的活性及MPO、LPO的含量。数据分析采用SPSS20.0forWindows统计分析软件。
结果：
1.肝脏指数显示：与空白组比，模型组小鼠肝脏指数下降(P＜0.05)；与模型组比，针刺、艾灸组的肝脏指数升高，但无统计学意义(P＞0.05)；与针刺组比，艾灸组的肝脏指数较高，但无统计学意义(P＞0.05)。
2.各组小鼠的肝脏组织切片的病理形态观察结果显示：空白组肝细胞核型规则，形态一致；模型组肝细胞出现核碎裂，细胞坏死，周围呈炎性反应改变，肝细胞胞浆疏松、肿胀；针刺组与艾灸组的肝细胞肿胀程度较轻，未见明显炎性细胞浸润。
3.针刺、艾灸对小鼠肝脏组织中GSH、GSH-px活性的影响：与空白组比较，模型组中GSH、GSH-px的表达下降(P＜0.05)；与模型组比较，针刺组与艾灸组肝脏组织中GSH、GSH-px的表达升高(P＜0.05)；与针刺组比较，艾灸组中GSH、GSH-px的表达升高较明显(P＜0.05)。
4.针刺、艾灸对小鼠肝脏组织中MPO、LPO含量的影响：与空白组比较，模型组中MPO、LPO的含量升高(P＜0.05)；与模型组比较，针刺组与艾灸组肝脏组织中MPO、LPO的含量降低(P＜0.05)；与针刺组比较，艾灸组中MPO的含量升高较明显(P＜0.05)，艾灸组中LPO含量升高但显示不具有统计学意义(P＞0.05)。
结论：
1.针刺、艾灸可以提高小鼠肝脏指数，修复因顺铂导致的肝脏损伤。
2.针刺、艾灸可以改善肝损伤，主要表现为针刺、艾灸可以修复顺铂导致的肝细胞炎症、肿胀、坏死的情况。
3.针刺、艾灸可以提升肝脏组织中GSH、GSH-px的活性，拮抗氧化应激反应使之趋于平衡，增强抗氧化能力，修复顺铂导致的肝脏氧化损伤。
4.针刺、艾灸可以降低肝脏组织中MPO、LPO的含量，抑制过氧化脂质，减轻对肝脏组织的损伤，修复受损的肝功能。
本课题建立顺铂(cisplatin,DDP)诱导的小鼠肝脏损伤模型，经过针刺、艾灸干预后，观察顺铂诱导的小鼠肝脏组织的形态学改变以及肝脏组织中还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、过氧化脂质(LPO)、髓过氧化物酶(MPO)含量的变化。阐明针灸修复顺铂诱导的小鼠肝脏损伤的作用及机理。
方法：
选取40只昆明种雄性清洁级小鼠，7周龄，体重20±2g，随机分成4组，每组各10只，即空白组(A)，模型组(B)，针刺组(C)，艾灸组(D)。在前期研究基础上，空白组按照10mg/kg腹腔注射0.9％Nacl溶液(注射1次)，其余3组分别按照剂量10mg/kg腹腔注射DDP(注射1次)，24小时后模型成功。造模24小时之后从每组分别随机选取1只小鼠处死，做肝脏病理学切片观察，以验证顺铂致肝损伤模型成功。依据各组小鼠腹腔注射药物的先后顺序，依次在每天的同时间段进行一定的干预，分别是A、B组的小鼠依次进行陪同固定，每天1次，连续5天；C、D组的小鼠则选取“大椎”、“肝俞”、“肾俞”、“足三里”，固定人员对其分别进行针刺、艾灸，每天1次，连续5天。治疗结束，次日取材，取出肝脏称重，将小鼠的肝左叶用4%的多聚甲醛固定，待做病理切片用；将小鼠的肝右叶取出并放置于-80℃冰箱保存留用，以待用酶联免疫吸附实验方法(ELISA)检测小鼠肝脏组织中GSH、GSH-px的活性及MPO、LPO的含量。数据分析采用SPSS20.0forWindows统计分析软件。
结果：
1.肝脏指数显示：与空白组比，模型组小鼠肝脏指数下降(P＜0.05)；与模型组比，针刺、艾灸组的肝脏指数升高，但无统计学意义(P＞0.05)；与针刺组比，艾灸组的肝脏指数较高，但无统计学意义(P＞0.05)。
2.各组小鼠的肝脏组织切片的病理形态观察结果显示：空白组肝细胞核型规则，形态一致；模型组肝细胞出现核碎裂，细胞坏死，周围呈炎性反应改变，肝细胞胞浆疏松、肿胀；针刺组与艾灸组的肝细胞肿胀程度较轻，未见明显炎性细胞浸润。
3.针刺、艾灸对小鼠肝脏组织中GSH、GSH-px活性的影响：与空白组比较，模型组中GSH、GSH-px的表达下降(P＜0.05)；与模型组比较，针刺组与艾灸组肝脏组织中GSH、GSH-px的表达升高(P＜0.05)；与针刺组比较，艾灸组中GSH、GSH-px的表达升高较明显(P＜0.05)。
4.针刺、艾灸对小鼠肝脏组织中MPO、LPO含量的影响：与空白组比较，模型组中MPO、LPO的含量升高(P＜0.05)；与模型组比较，针刺组与艾灸组肝脏组织中MPO、LPO的含量降低(P＜0.05)；与针刺组比较，艾灸组中MPO的含量升高较明显(P＜0.05)，艾灸组中LPO含量升高但显示不具有统计学意义(P＞0.05)。
结论：
1.针刺、艾灸可以提高小鼠肝脏指数，修复因顺铂导致的肝脏损伤。
2.针刺、艾灸可以改善肝损伤，主要表现为针刺、艾灸可以修复顺铂导致的肝细胞炎症、肿胀、坏死的情况。
3.针刺、艾灸可以提升肝脏组织中GSH、GSH-px的活性，拮抗氧化应激反应使之趋于平衡，增强抗氧化能力，修复顺铂导致的肝脏氧化损伤。
4.针刺、艾灸可以降低肝脏组织中MPO、LPO的含量，抑制过氧化脂质，减轻对肝脏组织的损伤，修复受损的肝功能。