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光学活性的手性醇因其在精细化学品、医药等制备中的广泛应用而日益受到关注。酶催化的不对称还原反应具有对映选择性高、原子利用率高、反应条件温和等特点,因而被广泛用于合成手性醇化合物。酶催化的不对称还原反应得到的大多数都是Prelog产物,而且自然界存在的生物酶大都数遵循Prelog规则,已报到的有限的反-Prelog氧化还原酶远远无法满足实际的需求。本文利用基因挖掘法从数据库中筛选得到一株来自于Lactobacillus composti的反-Prelog短链脱氢酶(SDR)LcSDR,并在大肠杆菌中成功表达。主要研究结果如下:1.对重组菌E.coli BL21(DE3)/pET28b-lcsdr的培养条件进行了优化,确定其最适产酶条件为:种龄7 h,接种量为2%(v/v),37°C培养3 h后加入9.0 g?L-1乳糖诱导,28°C诱导10 h。在此条件下,比酶活为3511.6 U?g-1,生物量(DCW)为3.82 g?L-1。2.研究了LcSDR的酶学性质。LcSDR属于非金属依赖型还原酶,分子量(加上His-tag)约为30 kDa。LcSDR的最适pH为6.5,在pH为6.0或7.0时稳定性较好。LcSDR最适反应温度为30°C,在30°C和35°C有较好的热稳定性。3.对LcSDR的酶促反应动力学进行考察,得到其对底物和辅酶的米氏常数Km以及最大反应速率Vmax,分别为0.345 mmol?L-1,0.085mmol?L-1和133.9μmol?(mg·min)-1。4.研究优化了重组短链脱氢酶(LcSDR)不对称还原苯乙酮生成(R)-苯基乙醇的催化工艺。构建了LcSDR与葡萄糖脱氢酶(EsGDH)双酶偶联体系。在苯乙酮浓度为50 g?L-1时,反应2 h后反应到达平衡,得率为93.8%,e.e.p≥99%,时空产率达到562.8 g?L-1?d-1。当苯乙酮浓度增大至100 g?L-1时,反应3.5 h达到平衡,最终产物得率为78.3%,e.e.p≥99%,时空产率为536.8 g?L-1?d-1。底物浓度进一步增大至150 g?L-1、200 g?L-1,产率下降很快分别为63.8%和48.4%,时空产率分别为510.3 g?L-1?d-1和516.5 g?L-1?d-1,e.e.p≥99%。本研究成功实现了高浓度和高立体选择生成(R)-苯基乙醇,这对其工业应用是一个巨大的潜力。