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研究背景:鼻咽癌（NPC）其恶性程度高、进展快速,为我国中南部两广地区常见头颈部的恶性肿瘤。放疗联合化疗是NPC目前重要治疗手段,局部控制率达80%以上,然而,放疗后的复发和远处转移是目前临床上治疗的两个大难题。所以,寻求到治疗效果好和副作用小,又能够针对上述难题的抗肿瘤药物,是目前临床上急需解决的问题。茶黄素（TF）,是茶叶发酵的产物之一,存在于红茶中。报道显示,TF具有抑制癌细胞的增殖、诱导凋亡等作用,是理想的抗肿瘤中药单体。本课题组在抗NPC中药单体的筛选中发现TF对NPC也具有抑制作用,但尚无关于TF对NPC的作用及其分子机制的相关报道。因此,本实验将深入探讨TF抗NPC的作用及其机制。研究目的:探索在体外茶黄素作用于人鼻咽癌细胞的增殖、凋亡、侵袭迁移的影响,及其潜在的分子机制。研究方法:本实验中,采用不同浓度的茶黄素作用于鼻咽癌CNE1、CNE2细胞。首先,通过CCK-8法检测CNE1和CNE2细胞在24、48、72小时的生长情况,计算其细胞抑制率;通过细胞平板克隆形成实验检测CNE1和CNE2细胞集落形成变化;通过Transwell小室实验观察CNE1和CNE2的侵袭、迁移情况;利用细胞划痕实验观察CNE1和CNE2细胞的迁移情况;采用Hoechst 33258染色观察CNE1、CNE2细胞的凋亡,利用流式细胞术检测细胞凋亡率和周期的改变;通过实时荧光定量PCR检测CNE1和CNE2细胞增值及凋亡相关基因的mRNA表达情况;利用Western Blot对调亡相关蛋白的表达水平进行检测。研究结果:实验研究结果显示,通过CCK-8法检测,随着药物浓度增加和作用时间延长,TF对CNE1和CNE2细胞的增殖出现明显抑制作用,作用效果呈现时间-浓度依赖关系;细胞平板克隆实验显示TF能明显降低CNE1、CNE2细胞的克隆能力;细胞划痕实验及Traswell实验显示,TF能够抑制CNE1和CNE2细胞的迁移、侵袭能力;Hoechst 33258染色显示茶黄素作用于CNE1、CNE2细胞后,出现了核固缩等现象;细胞流式术检测发现,TF处理CNE1、CNE2细胞后,细胞凋亡率均随药物浓度升高而增大;在周期检测中,CNE1细胞被阻滞在S和G2/M期,CNE2细胞被阻滞在G2/M期;利用实时荧光定量PCR检测鼻咽癌细胞增值和凋亡相关基因,结果显示TF能够上调CNE1和CNE2细胞的凋亡相关基因bax、caspase-3的表达水平,下调bcl-2和survivin的表达水平;还能上调细胞周期相关基因p21、p53表达量,下调CDK1和CDK2表达量;Western blot结果显示茶黄素作用CNE1和CNE2细胞后,凋亡相关蛋白caspase-3、bax表达上调,bcl-2表达下调。研究结论:1、茶黄素可以上调p53,引起p21的激活,进而使CDK1和CDK2的表达抑制,使鼻咽癌细胞在S和G2/M期被停滞,抑制CNE1和CNE2细胞的增殖。2、茶黄素能够使bax、caspase-3的表达量上调,bcl-2的表达量下调,诱导鼻咽癌细胞的凋亡。3、茶黄素可以抑制鼻咽癌CNE1和CNE2细胞的侵袭迁移。