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对肿瘤发病机制的研究一直是医学领域研究的热点之一,但以往对发病机制及其演进过程的研究多集中于肿瘤相关基因的检测,而对于遗传物质在细胞核内的空间构象的变化与肿瘤的发生及发展是否还存在着相关性却未予足够重视。70年代末就有人提出了每个染色体在核内都占有一个特定的空间区域,称为染色体结构域。为此人们还提出了许多的数学模型,来解释染色体的拓扑结构同其功能的关系。多数人认为,染色体结构域在核内位置相对恒定,但在细胞周期循环中也呈现有规律的变化。在肿瘤发生时,其本身的拓朴结构,包括体积,表面积、形状以及在核内的空间位置都会发生一系列的变化。而肿瘤中常出现的染色体易位也与染色体在核内构象有关,相邻染色体间发生易位的频率要大于非相邻的染色的易位,也就是说染色质在核内的空间定位决定了易位及肿瘤的发生概率。 慢性髓细胞性白血病(CML)是起源于单一克隆的造血系统恶性肿瘤疾病,在95%的CML患者都可检测到特异的ph染色体,它是第9、22号染色体相互易位而成,即9号染色体长臂上的c-abl与22号染色体长臂的断裂点集中区(BCR)相互易位形成bcr-abl融合基因,其编码的融合蛋白具有酪氨酸激酶活性,是CML发病机制中的主要因素。CML在临床上分为慢性期、加速期和急变期,它们在细胞遗传学及分子生物学上存在着较大异质性,在急变期常会出现额外的染色体和基因的变异。但是这些异常是否与相关染色体在核内的拓朴结构的改变有关尚不清楚,这些变化在CML的发生和演进中的意义如何,目前也无确凿的证据。 我们利用荧光原位杂交和激光共聚焦扫描显微镜方法,选用bcr,abl,c-mmc和的3单拷贝恻A探针,第 8,9,17和 22号全染色体探针,观察了与慢粒相关的遇传物质在间期核内拓扑学的表现和变异情况。结果发现:在人淋巴细胞株IM-9和KapZ细胞中,相关基因在问期核内的三维空间定位呈非随机分布,her和abl基因之问的融合同二者在核内的分布区域的一致性是有关的,提示基因之间的融合频率同其在核内三维空间相互位置呈正相关;同源染色质的拓扑学表现具有差异性,井且在细胞周期循环中表现出动态的变化。染色质的凝集和松散结构同染色质的活性密切相关,同源染色质之间的凝集程度存在着差异性。放射可以促使 IM-9细胞中比 和 abl基因相互接近,同时能改变第 9,22号染色质的形状和凝集程度,促使二者更加松散和伸展,活性增加,并使居于其上的abl和伙 基因的空间位置发生改变,使碍二者之间更加接近,这可能是放射引起her和abl融合的原因之一。 CML是一种恶性克隆增殖性疾病,几乎每个病例最终都会发生急性变。在慢粒急变时,C-CyC和 P53基因在细胞核内的空间定位会发生明显的变化,都有一个向心性的移动过程,同时,第8和17号染色质的拓扑结构也发生了明显的变化,其表现更接近于K562细胞。这些结果提示,旷myc和的3在细胞核内空间定位的变化以及第8和17号染色质拓扑形态的改变同慢粒的急变之间存在着明显的相关性,这些基因或染色体的拓扑学的变异情况有可能成为判断慢粒急变的检测指标之一。