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目的:建立大鼠溃疡性结肠炎实验模型及维药西帕依溃结安干预方法,观察结肠组织中COX-2 mRNA表达水平及其受维药西帕依溃结安治疗作用的影响,探讨COX-2在溃疡性结肠炎发病和发展过程中的作用;构建大鼠COX-2基因的真核表达GFP重组载体pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO-COX-2,应用基因枪技术将其转导入活体结肠组织,检测外源性蛋白GFP在大鼠活体结肠组织中的表达,从而探索溃疡性结肠炎发病基因敏感点,为寻找维药西帕依溃结安的基因作用靶点奠定基础。方法:制备大鼠溃疡性结肠炎模型,实验动物分为溃疡性结肠炎模型组、正常组、溃结安干预组、5-氨基水杨酸(5-ASA)阳性对照组、生理盐水(NS)阴性对照组共5组。采用RT-PCR的方法,检测各组结肠组织COX-2的mRNA表达差异;克隆COX-2的cDNA长片段,构建大鼠COX-2基因的真核表达GFP重组载体,应用基因枪技术转导入大鼠活体结肠中,Western blot方法检测外源性COX-2绿色荧光融合蛋白在实验动物体内的表达水平。结果:与正常组及生理盐水(NS)阴性对照组相比,模型组结肠组织中COX-2表达显著增高(P＜0.05)。与模型组相比5-氨基水杨酸(5-ASA)阳性对照组、溃结安药物干预组COX-2表达显著降低(P＜0.05)。运用基因枪技术转导pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO-COX-2重组载体,24小时后可以检测到大鼠结肠组织中有外源性COX-2绿色荧光融合蛋白的表达。结论:COX-2参与了溃疡性结肠炎发生、发展过程,而维药西帕依溃结安可能正是通过抑制了COX-2的活性而发挥其治疗作用。为了进一步探讨其分子生物学作用机理,我们成功构建了大鼠COX-2基因的真核表达GFP重组载体pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO-COX-2,并且运用基因枪技术可以有效地将其转导入大鼠活体结肠组织内,为进一步应用RNA干扰技术明确溃结安的基因作用靶点奠定基础。