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【背景】帕金森病（Parkinson Disease，PD）是老年人群中发病率很高的一种神经系统退行性疾病，氧化应激损伤在帕金森病的发生中起着关键作用已被广泛认可。Sp1是第一个被克隆和纯化的核转录因子，具有高度保守的DNA结合序列。Sp1通过自身及其下游基因表达的调节参与多种细胞的增殖、凋亡及相关疾病的发生发展和治疗。体内外实验研究均证实，氧化应激条件下，Sp1的表达及其与NR1启动子结合活性均上调，进而上调NR1的表达，介导后续的兴奋毒性及细胞凋亡。N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体在神经系统疾病中的作用越来越受到关注。NMDA受体主要存在突触前膜，是由NR1、NR2A-D、NR3A-B等亚单位构成的异四聚体。NR1是功能性NMDA受体的必须基团，PC12细胞中主要表达NR1。氧化应激后，兴奋性谷氨酸过度激活NMDA受体导致神经元胞内钙超载而触发的系列生化改变和诱导相关基因的表达可能是导致神经元损伤的重要原因，因此该受体通道的调控在氧化应激的治疗中可能是重要的靶点之一。近年来发现虾青素（astaxanthin，ATX）具有显著的抗氧化损伤、清除自由基、抗凋亡等生物学作用，可顺利通过血脑屏障，有望成为治疗神经退行性疾病的保护性药物。Sp1/NR1细胞信号通路在MPP~+诱导的PC12细胞氧化应激损伤中作用未见报道，ATX是否通过Sp1/NR1细胞信号通路拮抗MPP~+诱导的PC12细胞氧化应激损伤也未见报道。因此研究ATX对MPP~+诱导的PC12细胞损伤的保护作用的机制，为寻求有效的保护和治疗PD提供新的思路，意义重大。【目的】1、探讨ATX对MPP~+诱导的帕金森病细胞模型PC12细胞是否具有保护作用。2、探讨ATX是否通过Sp1/NR1细胞信号通路拮抗MPP~+诱导的氧化应激损伤。【方法】1、PC12细胞（高分化）应用MPP~+(0、125、250、500、1000、2000umol/L)加入培养基中，制备帕金森病氧化损伤细胞模型。ATX(0、1.25、5、10、20umol/L)以及Sp1特异性抑制剂MIT(0、0.045、0.09、0.18、0.36、0.72umol/L)加入培养基中观察细胞生长情况。2、 MTT法检测细胞活力，观察不同浓度ATX、MIT、MPP~+培养细胞24h后细胞活力变化。3、流式细胞分析技术检测PC12细胞胞内的活性氧水平。4、免疫印迹法和Real time RCR分别检测PC12细胞内Sp1、NR1mRNA和蛋白的表达变化。5、细胞免疫荧光技术（共聚焦显微镜）检测Sp1、NR1蛋白在PC12细胞内的定位、表达及Sp1的核转移情况。6、统计学处理。【结果】1、MTT法测定MPP~+处理细胞存活率明显下降；ATX处理后细胞存活率较空白对照组上升，且存在剂量依赖关系；MIT在一定浓度范围内对细胞存在轻度损伤作用；ATX和MIT预干预都对MPP~+处理的细胞有较明显的保护作用。2、流式细胞分析技术检测PC12细胞内的活性氧水平，MPP~+处理后活性氧明显上升，ATX预处理2h后再加入MPP~+处理，胞内活性氧明显下降。3、免疫印迹法半定量PC12细胞内Sp1、NR1蛋白的表达变化，MPP~+处理组与空白对照组比较明显升高，差异有显著性意义(P<0.01)；与MPP~+(500umol/L)组相比，ATX(10umol/L)+MPP~+(500umol/L)组、MIT(0.36umol/L)+MPP~+(500umol/L)组以及MIT(0.36umol/L)+ATX(10umol/L)+MPP~+(500umol/L)组细胞Sp1、NR1蛋白表达下降，差异均有显著性意义(P<0.01)。4、Real-time RCR半定量PC12细胞内Sp1、NR1mRNA表达变化，MPP~+处理组细胞与空白对照组比明显升高，差异有显著性意义(P<0.01)；与MPP~+(500umol/L)组相比，ATX(10umol/L)+MPP~+(500umol/L)组、MIT(0.36umol/L)+MPP~+(500umol/L)组以及以及MIT(0.36umol/L)+ATX(10umol/L)+MPP~+(500umol/L)组细胞Sp1、NR1蛋mRNA表达下降，差异有显著性意义(P<0.01)。5、细胞免疫荧光技术表明蛋白Sp1在胞核和胞浆均有表达，NR1蛋白则主要在胞浆表达。在MPP~+干预后，Sp1还存在核转移，从胞浆转移至胞核，ATX、MIT均可在一定程度上抑制这种核转位作用。而且，我们还可以看到，Sp1、NR1蛋白的表达变化趋势与免疫印迹法、Real-time RCR半定量法大致相当。【结论】1、 ATX、MIT对MPP~+诱导的PC12细胞模型损伤具有保护作用。2、 ATX对MPP~+诱导的PC12细胞模型损伤的保护作用可通过抑制Sp1/NR1路径实现。