论文部分内容阅读
目的:研究 miRNA-181a在人肺腺癌细胞中的表达及转染人肺腺癌耐药细胞A549/DDP后对细胞功能的影响。 方法:利用实时荧光定量PCR方法检测miRNA-181a在人正常胚肺细胞系HELF、人肺腺癌细胞系 A549、人肺腺癌耐药细胞系 A549/DDP中的表达;利用pGenesil-miRNA-181a真核表达质粒转染A549/DDP细胞,同时设置未转染组和空载组;实时荧光定量 PCR检测 miRNA-181a转染前后的表达情况;MTT方法检测miRNA-181a转染前后对A549/DDP细胞活力和顺铂(DDP)作用下增殖抑制率的影响;流式细胞术检测miRNA-181a转染前后对A549/DDP细胞周期和顺铂作用下细胞凋亡率的影响;Tran swell方法检测miRNA-181a转染前后对A549/DDP细胞侵袭能力的影响;Western-blot方法检测miRNA-181a转染前后对A549/DDP细胞中靶基因Bcl-2和p53蛋白表达的影响。 结果:miRNA-181a在A549和A549/DDP中的表达量显著低于HELF,(p?0.05),且在A549/DDP中表达量最低;miRNA-181a转染A549/DDP细胞后表达显著升高,(p?0.05);miRNA-181a转染A549/DDP后能够抑制其细胞生长活力、细胞周期和细胞侵袭能力(p?0.05);同时促进顺铂作用下A549/DDP细胞增殖抑制和细胞凋亡(p?0.05);miRNA-181a转染A549/DDP后抑制Bcl-2蛋白表达而促进p53蛋白表达(p?0.05)。 结论:miRNA-181a在人肺腺癌A549及A549/DDP中低表达,而miRNA-181a转染A549/DDP后抑制细胞活力、细胞周期、侵袭能力,提高顺铂作用下的增殖抑制率和细胞凋亡率,并通过抑制靶基因Bcl-2蛋白,促进p53蛋白表达发挥作用。