【摘 要】
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为了加强对13/17罗伯逊易位猪这一种质资源的保护和进一步研究,本文以初生13/17罗伯逊易位杂合子猪、纯合子猪及正常核型家猪耳部皮肤组织为材料,应用组织块分离培养法构建了3
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为了加强对13/17罗伯逊易位猪这一种质资源的保护和进一步研究,本文以初生13/17罗伯逊易位杂合子猪、纯合子猪及正常核型家猪耳部皮肤组织为材料,应用组织块分离培养法构建了3种核型家猪的成纤维细胞系,冷冻保存细胞60支。试验对所分离的成纤维细胞进行了形态观察、生长动力学、染色体核型分析、绿色荧光蛋白报告质粒转染以及微生物污染检测等方面的生物学特性研究。 结果表明:倒置相差显微镜下3种核型家猪细胞形态呈梭形且长势良好,为标准成纤维细胞形态。冻存细胞复苏之后活力分别为94.0%(杂合子猪)、93.3%(纯合子猪)、92.8%(正常核型家猪),说明间歇降温冻存法效果良好。免疫组化结果表明细胞内波形蛋白呈现阳性表达。细胞生长曲线呈“S”型,细胞经历了生长缓慢期,生长对数期以及生长平台期三个阶段。细胞核型分析显示杂合子猪细胞染色体2n=37所占比例为92.5%,纯合子猪细胞染色体2n=36所占比例为93.8%,正常核型家猪细胞染色体2n=38所占比例为96.3%。质粒转染结果表明外源质粒能够稳定地在细胞中进行表达。细菌、真菌、病毒、支原体检测结果均为阴性。表明本研究已成功建立13/17罗伯逊易位猪成纤维细胞系。
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