Th17/Treg细胞在实验性牙周炎发病机制中的作用研究

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[目的]通过建立大鼠实验性牙周炎模型,探讨辅助性T细胞17(T helper cell,Th17细胞)和调节性T细胞(Regulatory T cell, Treg细胞)在牙周炎发病机制中的作用。[方法]选用7-8周龄健康雄性SD大鼠24只,随机分为两组:正常组(12只),牙周炎组(12只)。牙周炎组采用上颌第二磨牙牙颈部丝线结扎+高糖水+接种牙周卟啉单胞菌诱导实验性牙周炎模型。分别于模型建立成功后第2周、第4周、第6周,每组取4只,10%水合氯醛麻醉下心脏采血后处死,迅速取出牙龈组织保存于液氮中,运用实时荧光定量PCR方法检测大鼠牙龈组织中Th17细胞和Treg细胞转录因子ROR-γt、Foxp3的表达;分离左侧上颌骨行甲基蓝染色测量牙槽骨丧失情况;右侧上颌骨行HE染色和Trap染色;流式细胞术检测外周血中Th17细胞和Treg细胞的比例变化;ELISA检测血清中白介素6(interleukin6, IL-6)、IL-10、IL-17、转化生长因子β(Transforming growth factorβ,TGF-β)、干扰素γ (Interferony, IFN-γ)的含量变化,采用SPSS17.0统计数据包对实验结果进行统计学分析。[结果]造模后第14、28天,与正常组相比,牙周炎组体重增长没有正常组明显,具有统计学意义(P<0.05)。牙周炎组探针深度及牙槽骨丧失量较正常组显著(P<0.05)。牙周炎组Thl7细胞的比例及其转录因子ROR-γt,细胞因子IL-17、IFN-γ的表达随着炎症反应加重逐渐升高(P<0.05);同时Treg细胞比例和转录因子Foxp3的表达升高(P<0.05),而相关细胞因子IL-10在第4周和TGF-β在第4、6周低于正常组,差异具有统计学意义(P<0.05)。血清IL-6水平在整个实验期间二者差别无统计学意义(P>0.05)。(结论]牙颈部丝线结扎+高糖水+接种牙周卟啉单胞菌能成功诱导实验性牙周炎模型,2周即可建立牙周炎模型。Thl7细胞在大鼠实验性牙周炎的发病过程中,介导炎症反应,可促进骨组织破坏吸收。而Treg细胞在大鼠实验性牙周炎的炎症发展过程中起抑制的作用。
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