羟基喜树碱抑制视网膜母细胞瘤HXO-RB细胞增殖及诱导凋亡的研究

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目的:研究羟基喜树碱(HCPT)对体外培养的人视网膜母细胞瘤细胞系HXO-RB<,44>增殖的影响及其诱导HXO-RB<,44>细胞凋亡的作用,并初步探讨其影响细胞增殖和诱导细胞凋亡的机制。 方法:体外培养HXO-RB<,44>细胞系,定期传代换液。各实验中HCPT均选取10<-5>,10<-4>,10<-3>,10<-2>,10<-1>mg/ml五个药物浓度,并设空白对照组。采用MTT法检测羟基喜树碱对HXO-RB<,44>细胞生长的抑制作用。采用流式细胞仪定量检测HCPT处理24h后细胞周期的改变及细胞凋亡的百分率。采用Western blot免疫印迹技术检测HCPT处理24h后细胞内bcl-2蛋白表达水平的变化。 结果:羟基喜树碱在一定浓度范围内(10<-5>mg/ml,10<-4> mg/ml,10<-3>mg/ml,10<-2>mg/ml,10<-1>mg/ml)能够抑制HXO-RB<,44>细胞的生长,将细胞周期阻滞在S期,具有时间、剂量依赖性。流式细胞仪检测不同浓度的羟基喜树碱10<-5>mg/ml,10<-4>mg/ml,10<-3>mg/ml,10<-2>mg/ml,10<-1>mg/ml作用24小时后细胞凋亡率分别为5.67±1.65%,10.09±1.03%,12.39±0.82%,48.54±1.27%,18.82±0.96%。Dunnett-t检验均与对照组差异有统计学意义(p<0.05)。Western blot免疫印迹检测结果表明羟基喜树碱作用24小时后,HXO-RB<,44>细胞中bcl-2蛋白表达水平较正常对照组细胞明显下调。 结论:羟基喜树碱能够抑制HXO-RB<,44>细胞的增殖,其抑制细胞增殖作用具有时间和浓度依赖性,且羟基喜树碱是通过将细胞阻滞在细胞周期的S期而起到抑制HXO-RB<,44>细胞增殖的作用;羟基喜树碱可以诱导HXO-RB<,44>细胞凋亡,其诱导凋亡作用与下调细胞内bcl-2蛋白表达有关。
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