HiWi蛋白在卵巢癌中的表达及临床意义研究

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目的:通过检测Hiwi蛋白在不同病理类型卵巢癌及正常卵巢组织中阳性表达例数,计算阳性表达率情况,分析Hiwi蛋白阳性表达与卵巢癌患者临床病理特征之间的相关性,探讨Hiwi蛋白对卵巢癌发生发展过程的影响;通过检测Hiwi mRNA在卵巢癌组织中的表达水平,在分子水平上进一步验证卵巢癌发病机制中Hiwi蛋白可能发挥的作用;通过跟踪随访入组患者的生存时间,绘制生存曲线,评估预后,探讨Hiwi蛋白在评估患者预后,病情监测中的可能的作用及临床意义。方法:搜集解放军第401医院2012.01--2018.01手术切除的卵巢癌组织49例(浆液性癌26例,黏液性17例,其他类型6例;Ⅰ~Ⅱ期19例,Ⅲ~Ⅳ期30例)进行SP染色。根据课题设计,设立对照组。对照组为同期因其他疾病行卵巢切除的20例正常卵巢组织,所有患者术前均未经任何治疗,均行卵巢癌肿瘤细胞减灭术。1.应用免疫组化技术SP法来检测Hiwi蛋白在不同病理类型、不同分期的卵巢癌患者组织及正常卵巢组织中的阳性表达情况,同时进行染色评分,计算阳性表达率。2.根据第一步筛选出来的免疫组化阳性表达患者,对比其临床资料,分析Hiwi蛋白异常表达与患者临床病理特征之间的相关性,尤其是与年龄、临床分期、组织类型以及分化程度、淋巴结、大网膜转移之间的关系,结果进行统计学分析。3.应用实时荧光定量PCR法检测不同类型卵巢癌组织中Hiwi mRNA相对表达量,对mRNA的表达量进行统计学分析,在mRNA水平上分析Hiwi基因在卵巢癌发生、发展过程中作用及可能的分子机制。4.根据临床记录资料,跟踪随访卵巢癌患者生存时间,计算患者生存率,然后绘制患者生存曲线,Log-rank检验分析Hiwi蛋白在预估患者预后中的作用及临床意义。结果:1.免疫组化结果显示:Hiwi蛋白主要分布在癌细胞膜和细胞质中,未见核染色,呈棕黄色或棕褐色不同强度的染色。49例卵巢癌患者中Hiwi蛋白阳性表达者37例,阴性表达者12例,Hiwi蛋白在卵巢癌组织中阳性表达率为75.5%,而在正常卵巢组织中的阳性表达率为35%,差异有统计学意义(P<0.05)。2.卵巢癌组织中Hiwi蛋白高表达与患者临床分期、淋巴结及大网膜转移、分化程度等密切相关(P<0.05),而与患者年龄、组织类型无关(P>0.05)。Hiwi蛋白高表达患者临床分期越晚,分化程度越低,淋巴结、大网膜越容易发生转移。3.实时荧光定量PCR法检测卵巢癌组织中Hiwi mRNA相对表达量,其结果显示卵巢癌组织中Hiwi mRNA表达明显高于正常卵巢组织,差异有统计学意义(P<0.05)。4.对49例卵巢癌患者进行跟踪随访,37例Hiwi蛋白阳性患者死亡者23例,死亡率达62.16%,12例Hiwi蛋白阴性患者死亡者4例,死亡率为33.33%。对数据进行Log-rank检验,结果提示Hiwi蛋白高表达与患者术后生存率呈负相关(Log-rank=3.89,P=0.048)。结论:Hiwi蛋白在卵巢癌组织中高表达,Hiwi蛋白高表达患者临床分期越晚,分化程度越低,大网膜、淋巴结转移率越高。Hiwi蛋白可作为评估卵巢癌患者预后的一个重要指标。Hiwi蛋白有望成为卵巢癌基因治疗的靶标。Hiwi蛋白过表达,为卵巢癌发病机制、临床治疗及评估预后的研究提供新思路。
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