超氧化物歧化酶是一种金属酶,它能够使超氧阴离子自由基发生歧化反应,生成氧气和过氧化氢,从而消除超氧阴离子自由基对机体的危害,广泛存在于各种生物体内。目前已从细菌、藻类、霉菌、高等植物、昆虫、鱼类、鸟类和哺乳动物等各种生物体内分离得到,并通过多种方法应用到实际中,如化妆品、医药、食品、人及动植物许多疾病的检测与治疗方面。但是大多是从动物体内提取,因动物体内SOD含量多,活性高,相对来说免疫原性较小;而植物体内相对含量少,活性低。我国养殖业发展迅速,猪血资源丰富,但利用率不高,附加值很低,绝大部分直接排放到环境中,既造成资源的浪费,又污染了环境。猪血超氧化物歧化酶具有非常的活性,性能比较稳定,从猪血中分离纯化超氧化物歧化酶,可以物尽其用,变费为宝,有很高的社会经济效益。基于以上几方面的原因,本文探讨了从猪血中分离纯化SOD的方法并对其稳定性进行了研究。现将研究结果报告如下: 1.分离纯化研究 以新鲜猪血为材料,在低温条件下,高速离心除去血浆后,用0.9%的NaCl溶液洗涤红血球。将干净的红血球中加入0.6%的Triton X-100低温下冻融处理2小时,得到溶血液;用有机溶剂(乙醇-氯仿)处理溶血液,低温下离心除去血红蛋白,收集上清液,得到粗酶液;将粗酶液依次进行磷酸盐萃取、丙酮沉淀和适当的热处理,得到比活力比较高的酶液;再经过DEAE Sephadex A-50柱层析,得到纯化SOD。本课题对热变性法和丙酮沉淀法的最佳工艺参数进行