胡黄连单体Caffeoyl Glycoside免疫活性的体外研究

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研究目的:体外初步研究了胡黄连正丁醇溶剂萃取层Caffeoyl Glycoside(以下简称CG)单体成分的免疫活性,并从T淋巴细胞膜表面标志、DNA合成以及Th1(Ⅰ型辅助性T细胞)/Th2(Ⅱ型辅助性T细胞)主要细胞因子表达水平的测定等,从分子水平初步阐明其免疫增强作用机理,为寻找胡黄连中有效的免疫活性成分提供一定的科学与实验技术依据。实验方法:本实验通过MTT(四甲基偶氮唑盐)法检测CG对止常Balb/c小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;通过MTT法检测CG对NK细胞对K562细胞(人慢性髓原白血病细胞)杀伤活性的影响;通过MTT法及中性红吞噬实验检测CG对正常Balb/c小鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ)能量代谢水平及吞噬中性红能力的影响;通过流式细胞术检测CG对正常Balb/c小鼠脾淋巴细胞周期及脾中T淋巴细胞膜表面标志的影响;通过双抗夹心ELISA方法测定对Th1、Th2主要细胞因子的表达水平的影响。结论:胡黄连CG单体成分在一定剂量范围内单独或者协同非特异性丝裂原(Con A或LPS)作用均能够显著增强正常Balb/c小鼠脾淋巴细胞、PMΦ的增殖能力(P<0.05或P<0.01),CG在一定剂量范围内单独作用就能显著提高NK对K562细胞的杀伤活性(P<0.05或P<0.01),具有特异与非特异性的免疫增强作用;它们的作用机理可能是通过提升止常Balb/c小鼠脾中具有CD4~+(白细胞分化抗原簇4型)、CD8~+、和CD4~+/CD8~+表型的T淋巴细胞亚群的百分率,并增加进入DNA合成S期的脾淋巴细胞数量以及促进Th1/Th2的平衡向Th1方向移动,通过促进Th1,抑制Th2细胞因子的分泌,使得Th1/Th2达到平衡,治疗免疫相关性疾病。
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