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原发性肝癌是肝脏的主要恶性肿瘤，恶性程度高，具有极快的生长速度及极强的侵袭和远端转移能力。全球每年死于肝癌的病人高达50-100万，且其发病率仍在逐年增加。尽管早期肝癌患者可以通过外科手术、栓塞化疗等治疗手段使5年生存率提高到75%-80%，但目前针对晚期及术后肝癌复发患者仍缺乏有效的治疗手段。RhoC是Rho (ras homologous)亚家族成员之一，是一类与ras同源的小GTP结合蛋白，Rho亚家族蛋白的异常表达可能与恶性肿瘤的侵袭、转移有关。已有的资料表明，RhoC基因产物的过量表达与肝癌发展及侵袭、转移有密切关系[5]。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）是细胞内多种重要信号转导途径的枢纽，雷帕霉素（Rapamycin，Rapa）是目前已知的PI3K/Akt/mTOR细胞信号传导通路的特异性阻断抑制剂，通过抑制mTOR蛋白的活性，从而抑制肿瘤细胞的生长、增殖[2]。MMP2、MMP9、VEGF、CDK2、P16、Bcl-2、Bax等效应分子的激活在原发性肝癌的生长增殖、侵袭转移及凋亡过程中发挥着非常重要的作用。而相关研究提示，RhoC基因过度表达或mTOR的过度活化，可改变MMP2、MMP9、VEGF、CDK2、P16、Bcl-2、Bax等基因表达的变化。RhoC和mTOR蛋白在功能上虽有所区别，但两者的活化皆可引起上述相似的生化学变化。RhoC活化后可同时激活MAPK及PI3K/Akt信号途径，两条途径均与肿瘤细胞的增殖、转移、分化、侵袭、凋亡密切相关。而mTOR又是PI3K/Akt途径下游的主要靶分子之一。基于以上事实，我们推测MMPs、VEGF、CDK2、P16、Bcl-2、Bax的表达同时受RhoC和mTOR蛋白两个不同层面的调节。考虑联合抑制RhoC和mTOR蛋白的功能，将可能进一步下调MMPs、VEGF、CDK4、Bcl-2基因的表达，促进P16、Bax基因的表达，从而提高抑制HCC的生长、侵袭、迁移，并可促进细胞凋亡。方法：以人肝癌细胞Bel7402为对象，设空白对照组、阴性质粒组、RhoC-siRNA组、RhoC-siRNA联合Rapa组、阴性质粒联合Rapa组、Rapa组、溶媒组，分别采用RhoC基因沉默、Rapa或RhoC基因沉默联合Rapa处理，半定量RT-PCR法比较细胞周期蛋白相关基因CDK2mRNA，抑癌基因P16mRNA，侵袭相关基因MMP-2、MMP-9、VEGF mRNA及凋亡相关基因Bax、Bcl-2mRNA的表达；MTT法检测各组肝癌Bel7402细胞的生长增殖情况；Transwell小室检测肝癌Bel7402细胞迁移能力。结果：RhoC基因沉默及应用Rapa可明显抑制肝癌细胞Bel7402的增殖、侵袭及迁移，促进肝癌细胞的凋亡，二者联合应用上述效果更加明显。RhoC-siRNA组及Rapa组MMP2、MMP9、VEGF、CDK2、Bcl-2基因表达降低，P16、Bax基因表达升高（p<0.05）。RhoC-siRNA联合Rapa组MMP2、MMP9、VEGF、CDK2、Bcl2基因表达水平显著下降，P16、Bax基因的表达水平显著升高（p<0.05）。RhoC-siRNA联合Rapa显著抑制肝癌细胞迁移（p<0.01）。Transwell小室证实RhoC-siRNA联合Rapa可明显抑制肿瘤细胞的迁移，与其余各组相比具有统计学意义（p<0.01）；肿瘤细胞HE染色提示RhoC-siRNA组及经Rapa处理过的细胞的凋亡程度明显，而RhoC-siRNA联合Rapa组细胞的凋亡程度最明显也具有统计学意义（p<0.05）。结论：RhoC-siRNA质粒转染及应用Rapa可明显抑制肝癌Bel7402细胞的增殖、侵袭及迁移，并明显促进细胞的凋亡；二者联合应用可进一步加强上述效应，可更好的抑制肝脏肿瘤的发展。