铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,PA）是一种革兰氏阴性条件致病菌,是引起慢性感染的常见病原菌之一。异质性耐药（Heteroresistance）是细菌中的不同细胞亚群对抗生素的敏感性不同,是细菌由敏感菌株发展成耐药菌株的中间阶段。铜绿假单胞菌异质性耐药在临床上不易检出,影响选择合适的抗生素实现成功治疗,导致临床应用抗生素的失效,对病人健康带来威胁。本研究以临床分离的50株铜绿假单胞菌为实验菌株,以头孢他啶为实验材料,采用微生物学、转录组学及生理生化在内的多种技术手段,研究了铜绿假单胞菌对头孢他啶异质性耐药的表型特征及作用机制。论文主要取得了以下研究结果:1.研究发现临床分离铜绿假单胞菌对头孢他啶存在异质性耐药现象。50株铜绿假单胞菌经头孢他啶药敏测定表现为37株敏感,占比74%（37/50）;1株表现为中介,占比2%（1/50）;12株耐药,占比24%（12/50）。经K-B及PAP实验综合分析确证,4株铜绿假单胞菌对头孢他啶异质性耐药,占比8%（4/50）,异质性耐药亚群的发生频率为1×10-7-1.2×10-5。2.头孢他啶异质性耐药铜绿假单胞菌耐药表型可稳定遗传。通过分离异质性耐药亚群并测定其生长速率,同时在无抗生素条件下进行传代培养并测定其最小抑菌浓度（MIC）,发现耐药亚群无生长适应成本,耐药表型能稳定遗传。3.头孢他啶异质性耐药铜绿假单胞菌的异质性耐药机制复杂。通过对典型头孢他啶异质性耐药菌株PAS56进行转录组学分析,发现其异质性耐药涉及到孔蛋白Orp D相关基因的表达下调,外排泵系统Mex XY-Orp M、Mex AB-Orp M的相关基因表达上调,β-内酰胺酶Amp C编码基因的表达上调,青霉素结合蛋白PBP2相关基因表达上调,生物被膜合成相关基因表达上调及脂多糖生物合成相关基因的表达上调。综上,临床分离的铜绿假单胞菌对头孢他啶异质性耐药菌株占比高达8%,耐药亚群的发生频率为1×10-7-1.2×10-5,无生长适应成本,耐药表型能稳定遗传。典型异质性耐药菌株PAS56的异质性耐药机制涉及到孔蛋白的表达下调、外排泵系统、β-内酰胺水解酶、青霉素结合蛋白、生物被膜及脂多糖的表达上调。