葡萄球菌是最常见的化脓性球菌,也是医院交叉感染的重要来源之一,可以对人类和畜牧业造成严重的危害。近年来随着抗菌药物的滥用和多重耐药基因cfr在动物源菌株中的广泛传播,致使动物源葡萄球菌耐药现状备受关注。本论文对广东不同地区猪场中动物源和密切接触者携带cfr的葡萄球菌的流行特征及是否存在cfr阳性菌株的克隆传播进行了初步研究,旨在为指导临床合理应用抗菌药物,减缓耐药性传播提供一定的理论依据。2013年从猪场采集1000份猪及其密切接触者鼻拭子和肛门拭子样品,用甘露醇氯化钠琼脂培养基分离出995株革兰氏阳性菌株,采用PCR检测到到96株携带cfr的阳性菌株。采用镜检和MALDI-TOF-MS仪器鉴定携带cfr的阳性菌,检测到36株为葡萄球菌,检测率为3.6%(36/995)。其中,34株来源于猪,另外2株来源于人。通过PCR测定葡萄球菌的gap以及16S rRNA基因,对36株携带cfr葡萄球菌菌株进行进一步菌种鉴定。结果表明这36株主要为松鼠葡萄球菌(n=18),其次为腐生葡萄球菌(n=5),科氏葡萄球菌(n=4),阿尔莱葡萄球菌(n=3),缓慢葡萄球菌(n=1),木糖葡萄球菌(n=1),马胃葡萄球菌(n=1),另外还检测到1株金黄色葡萄球菌。采用琼脂稀释法测定36株携带cfr的葡萄球菌对临床常用的12种抗菌药物的最小抑菌浓度。结果表明,36株携带cfr的葡萄球菌对临床常用的多种药物均呈现出不同程度的耐药性。耐药率较高的依次有四环素、氨苄西林、克林霉素、头孢噻呋以及氟苯尼考,其耐药率依次为83.33%、77.78%、77.78%、75%以及75%。其余氯霉素、沃尼妙林、苯唑西林、红霉素、庆大霉素以及环丙沙星的耐药率分别为69.44%、63.89%、63.89%、52.78%、50%以及38.89%,而利奈唑胺较为敏感,其耐药率仅为5.56%。另外,耐甲氧西林葡萄球菌共有21株,占58.33%,还发现1株耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌。36株携带cfr的葡萄球菌,有30株对3~12种受试药物耐药,表明多重耐药性现象严重。采用PCR方法检测36株携带cfr的葡萄球菌中其它耐药基因,如fexA、ermA、ermB、ermC以及tetM、tetA和tetB。结果显示在36株携带cfr的葡萄球菌中有23株携带fexA基因,未检测到ermA、ermB、ermC、tetM、tetA及tetB基因。采用Sma-I PFGE对36株cfr阳性葡萄球菌进行亲缘关系分析。结果显示30株分型成功,PFGE图谱呈现多样性,其中16株松鼠葡萄球菌分为12个组群(>90%相似度),表明cfr阳性葡萄球菌多为为非克隆菌株,呈现多样化的遗传背景。但是,也发现克隆传播菌株,如来自于同一养殖场的腐生葡萄球菌菌株328和371,其中菌株328来源于猪,而菌株371来源于人以及来自于不同养殖场松鼠葡萄球菌菌株251和283的PFGE图谱呈现相似度为100%。综上所述,我国广东不同地区猪场中动物源和密切接触者中携带cfr葡萄球菌存在较低的流行性(3.6%),携带cfr葡萄球菌对苯唑西林耐药率较高(63.89%),而对利奈唑胺耐药率较低(5.56%),多重耐药情况较严重,表明cfr阳性葡萄球菌呈现多样化的遗传背景,但也存在克隆传播。在同一养殖场,人与猪之间可能存在cfr阳性菌株的克隆传播,存在威胁人类健康的可能。