乙醇降解菌的筛选及特性研究

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过量饮酒的醉酒治疗和乙醇废液的高效处理已成为研究热点,但对其生物处理,特别是对降解乙醇的微生物以及乙醇的降解机理的研究还不多。本文在对国内外解酒剂和工业生产乙醇后的废液处理等了解基础上,对乙醇降解菌及其生化特性进行了研究,为开发生物解酒剂和生物处理乙醇废液工艺提供了可靠的技术参数,具有重要的现实意义。本课题对乙醇降解菌主要进行了以下几个方面研究:1)乙醇降解菌的筛选研究。通过从泸州老窖窖池的黄水和窖泥以及永川醋厂的醋醅中取样,用乙醇作唯一碳源的基础培养基上,进行培养初筛;然后在培养基中添加乙醇并逐渐加大添加量进行驯化;最后进行复筛。实验结果表明,从黄水和窖泥中得到了1株降解乙醇能力较强的菌株,其降解乙醇速度达1.45ml/天。2)最佳培养条件的确定。经过实验设计,进行碳源、氮源以及C/N比三因素四水平的正交实验,分析确定其最佳培养基为:可溶性淀粉3g、NH4Cl 0.15g、K2HPO4·3H2O 0.1g、NaCl 0.04g、MgSO4·7H2O 0.05g、FeSO4·7H2O 0.001g、磷酸盐缓冲液1ml、微量元素溶液0.5 ml、蒸馏水100ml。另外,还对其生长条件进行了单因素实验研究。最后确定其最佳生长条件为:pH7.0、温度37℃、接种量107个/ml、接种前溶氧一天、恒温摇床160rpm振荡培养。同时,考察了该菌的乙醇脱氢酶在不同条件下的活性,乙醇脱氢酶活性最高可达145U/L。3)乙醇降解菌生长特性研究。通过测定该菌在一个生长周期内的菌液浓度变化情况,绘制出该菌株在最佳培养条件下的生长曲线。同时,考察了该菌的生化特性和乙醇脱氢酶活性。实验结果:生长曲线特征:延滞期14小时,对数期3小时、稳定期9小时,26小时后进入衰亡期。通过研究发现,乙醇降解菌降解乙醇能力为1.45ml/天,其培养条件和生化特性适合构建新的工程菌株以及实现大规模生产。因此,可以将该菌株作进一步研究应用于工业生产,为新型生物解酒药的研究和乙醇废液生物处理提供新的方向。
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