抗OPN抗体与沙鼠肝泡状棘球蚴侵袭性生长的相关性研究

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目的:建立沙鼠肝泡状棘球蚴动物模型,外源性给予抗OPN抗体,根据在不同生长阶段,沙鼠肝泡球蚴及转移组织中IL-2、IL-5、IL-10及TNF-α因子的表达水平,来探讨这四种因子在沙鼠肝泡状棘球蚴侵袭性生长和转移中的作用,观察抗OPN抗体对泡状棘球蚴生长发育的影响。  方法:选择4-6周龄健康长爪沙鼠180只,雌性,体重(30±5)g。随机分为三组,采用开腹直视下肝脏穿刺接种多房棘球蚴原头节混悬液的方法(0.1ml/只),建立肝泡状棘球蚴动物模型。一组单纯接种泡状棘球蚴组(模型组),二组在接种泡状棘球蚴同时予以抗OPN抗体干预(实验组),三组在接种泡状棘球蚴同时予以兔血清干预(对照组)。分别将三组接种泡状棘球蚴的沙鼠随机分成6小组,每小组10只,分别为感染1天、20天、40天、60天、80天、100天组。于相应时间处死各组沙鼠,观察泡状棘球蚴的生长、转移等情况;免疫组化法测定肝泡状棘球蚴及转移组织标本中的IL-2,IL-5,IL-10及TNF-α因子的表达。  结果:1天、20天、40天、60天、80天时间段,实验组与对照组、实验组与模型组间囊湿重比较无显著性差异(P﹥0.05),100天组时实验组与对照组、实验组与模型组囊湿重有显著性差异(F=48.82,P﹤0.05),而对照组与模型之间比较无差异(P﹥0.05);观察泡状棘球蚴转移现象,发现肺转移灶较少见,而胸廓淋巴结转移率较高,未见脑转移灶。统计结果显示:在1天、20天、40天、60天、80天时间段,实验组组与对照组、实验组与模型组胸廓淋巴结转移率无显著性差异(P﹥0.05),100天组时实验组与对照组、实验组与模型组胸廓淋巴结转移率有显著性差异(χ2=5.051,P﹤0.05);HE染色结果显示:在1天、20天、40天、60天、80天、100天时间段,实验组与对照组、实验组与模型组间E.m囊壁病理的改变无显著性差异(P﹥0.05);免疫组化染色结果显示:肝泡型棘球蚴组织中可见IL-2,IL-5,IL-10及TNF-α因子不同程度的表达,定位于细胞浆,主要分布在肝泡状棘球蚴纤维囊壁的生发层,细胞浆中可见黄色、棕黄色或棕褐色等阳性颗粒;1天、20天、40天、60天、80天时间段,实验组与对照组、实验组与模型组IL-2,IL-5,IL-10及TNF-α的阳性细胞率比较无显著性差异(P﹥0.05),100天组时IL-10的表达在实验组与对照组、实验组与模型组比较有显著性差异(P﹤0.05);而在100天时间段,IL-2,IL-5及TNF-α因子的表达在实验组与对照组、实验组与空白组免疫组化染色阳性细胞率比较无显著性差异(P﹥0.05)。  结论:Th1细胞介导的细胞免疫与Th2细胞介导的体液免疫共同参与了宿主抗肝泡状棘球蚴免疫。外源性给予抗OPN抗体可使肝泡状棘球蚴组织中IL-10的表达减低,这可能是抑制肝泡状棘球蚴的侵袭性生长和转移的机制之一。
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