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目的:1.观察益气养阴活血利水方对糖尿病视网膜病变的临床疗效。2.探讨益气养阴活血利水方对DR模型BN大鼠BRB损伤修复的干预效果。3.观察益气养阴活血利水方对DR模型BN大鼠视网膜Occludin、ZO-l蛋白表达的影响,以及探讨Occludin、ZO-l蛋白表达对BRB的影响。为益气养阴活血利水中药复方治疗糖尿病视网膜病变提供现代科学支持。方法:1.第一部分:临床研究,对确诊为DR患者46例92眼进行临床观察,据随机分组法分为治疗组、对照组、空白组三组,治疗组用益气养阴活血利水中药复方+常规降糖治疗,对照组用安多明+常规降糖治疗,空白组予单纯常规降糖治疗,通过对三组患者治疗前后视力、眼底体征、OCT及FFA比较,总结和评价其临床疗效。2.第二部分:STZ诱导DR模型,采用40mg·Kg-1STZ腹腔注射诱导BN大鼠DR模型的方法。当BN大鼠血糖稳定达到16.7mmol/L,确认建立DM模型。造模3月后进行FFA检查、血液流变学检测、瘀证指标P-Selectin检测,虚证指标cAMP、cGMP的测定,BRB形态学观察及视网膜消化铺片检查,确认成功建立DR模型。3.第三部分:将模型组随机分为5组(B组、C组、D组、E组、F组),空白组为A组,每组10只BN大鼠。A组和B组予蒸馏水灌胃,C组予安多明悬浮液灌胃5ml/kg(浓度为100ml含羟苯磺酸钙片1000mg),D组予益气养阴中药复方混悬液5ml/kg灌胃,E组予活血化瘀复方血栓通胶囊混悬液5ml/kg灌胃,F组予益气养阴活血利水中药复方混悬液5ml/kg灌胃,均相当于成人等效剂量。灌胃1月后测量BN大鼠的血糖、BRB通透性、血液流变学指标、瘀证指标P-Selectin,虚证指标cAMP、cGMP,并采用免疫组化、Western blot分别检测occludin、ZO-l蛋白的表达。结果:第一部分:1.与安多明及单纯常规降糖治疗相比较,益气养阴活血利水中药复方治疗DR对患者改善视功能,促进出血、水肿、渗出吸收,防治并发症等各方面具有显著疗效。2.治疗组总有效率为81.25%,对照组为53.13%,空白组为32.14%,治疗组疗效优于对照组(P<0.05),优于空白组(P<0.05)。3.治疗组视网膜出血、水肿、渗出等眼底病变吸收时间缩短,优于对照组(P<0.05),优于空白组(P<0.05)。4.治疗组臂-视网膜循环时间缩短,提示循环状态改善优于对照组(P<0.05),优于空白组(P<0.05)。第二部分:1.模型组血糖明显高于空白组,空白组体重明显比模型组重,P<0.01,差异有显著统计学意义。2.空白组比模型组全血粘度、血浆粘度、血浆纤维蛋白原、红细胞集聚指数低,P<0.05,差异有统计学意义。3.模型组比空白组血浆中P-Selectin的含量高,P<0.05,差异有统计学意义。4.模型组比空白组cAMP、cGMP及cAMP/cGMP均高,P<0.05,差异有统计学意义。5.模型组比空白组毛细血管密度明显要高,P<0.01,差异有显著统计学意义。6.模型组比空白组周细胞数明显要少,P<0.01,差异有显著统计学意义。7.模型组比空白组E/P明显要高,P<0.01,差异有显著统计学意义。8.模型组大鼠晶状体混浊,眼底窥不清,FFA显影效果不佳;空白组眼底结构清晰。第三部分:1.灌胃1月后,空白组体重比模型组体重明显要重,差异有统计学意义(P<0.05),B组和C组、F组体重有统计学意义(P<0.05),B组和D组、E组无统计学差异(P>0.05),C组和F组体重无统计学差异(P>0.05)。2.灌胃1月后,空白组比模型组血糖明显要低,P<0.05,差异有统计学意义;模型组之间比较,P>0.05,差异无统计学差异。3.灌胃1月后,A组的EB含量最低,B组EB含量最高;F组的EB含量要低于B组、C组、D组、E组,P<0.05,差异有统计学意义;且F组EB含量较灌胃前低,灌胃前后比较,P<0.01,差异有显著统计学意义。灌胃1月后,空白组比模型组视网膜厚度明显要薄,差异有统计学意义(P<0.05);B组比C组、F组视网膜要厚,差异有统计学意义(P<0.05);B组和D组、E组视网膜厚度比较,差异无统计学差异(P>0.05);C组和F组视网膜厚度比较,差异有统计学差异(P<0.05)。4.灌胃1月后,A组全血粘度、血浆粘度、血浆纤维蛋白原、红细胞集聚指数最低,其次是F组,B组最高。A组比B组、C组、D组、E组全血粘度、血浆粘度、血浆纤维蛋白原、红细胞集聚指数值要明显低,P<0.01,差异有显著统计学意义;A组与F组比较,P>0.01,差异无统计学意义;F组比B组、C组、D组、E组全血粘度、血浆粘度、血浆纤维蛋白原、红细胞集聚指数值要低,P<0.01,差异有统计学意义。5.灌胃1月后,A组大鼠血浆中P-Selectin含量最低,B组大鼠血浆中P-Selectin含量最高。A组比B组、C组、D组血浆中P-Selectin含量要明显低,P<0.01,差异有显著统计学意义;A组比E组、F组血浆中P-Selectin含量低,P<0.05,差异有统计学意义;E组、F组比B组、C组、D组血浆中P-Selectin含量要低,P<0.05,差异有统计学意义。6.灌胃1月后,B组大鼠视网膜匀浆组织中cAMP的含量最高,A组大鼠视网膜匀浆组织中cAMP的含量最低。A组和B组、C组、D组、E组比较,P<0.01,差异有显著统计学意义;A组和F组比较,P<0.05,差异有统计学意义;F组和B组、C组、D组、E组比较,P<0.05,差异有统计学意义。7.灌胃1月后,A组大鼠组视网膜匀浆组织中cGMP的含量比B组、C组、D组、E组cGMP含量明显要低,P<0.01,差异有显著统计学意;A组和F组比较,P>0.05,差异无统计学意义;F组和B组、C组、D组、E组比较,P<0.05,差异有统计学意义。8.灌胃1月后,A组大鼠视网膜匀浆组织中cGMP的含量比B组、C组、D组、E组都要明显低,P<0.01,差异有显著统计学意义;A组和F组比较,P>0.05,差异无统计学意义;B组和C组、D组、E组、F组比较,P<0.05,差异有统计学意义;F组和B组、C组、D组、E组比较,P<0.05,差异有统计学意义。9.灌胃1月后,免疫组化法分别检测occludin、ZO-l蛋白相对表达量,空白组明显高于模型组,差异有统计学意义P<0.05);B组比C组、F组要低,差异有统计学意义(P<0.05);B组和D组、E组比较,差异无统计学差异(P>0.05);F组比C组相对表达量要高,差异有统计学差异(P<0.05)。10.灌胃1月后,Western blot分别检测occludin、ZO-l蛋白相对表达量,空白组明显高于模型组,差异有统计学意义P<0.05);B组比C组、F组要低,差异有统计学意义(P<0.05);B组和D组、E组比较,差异无统计学差异(P>0.05);F组比C组相对表达量要高,差异有统计学差异(P<0.05)。结论:1.BN大鼠DR模型有气阴两虚、脉络瘀阻的证候特点。2.益气养阴中药复方可以改善DR大鼠阴虚指标。3.活血化瘀中药复方可以改善DR大鼠血瘀指标。4.occludin、ZO-1蛋白的相对表达量与BRB通透性呈负相关。5.益气养阴活血利水中药复方及安多明均可提高DR大鼠视网膜occludin、ZO-1蛋白的表达,其中益气养阴活血中药复方效果更佳。6.益气养阴活血利水中药复方及安多明均可修复DR大鼠BRB损伤,其中益气养阴活血利水中药复方效果更佳。7.推测益气养阴活血利水方治疗糖尿病视网膜病变的可能机制为:益气养阴活血利水方可能通过增加occludin、ZO-l蛋白的表达来修复BRB损伤。8.益气养阴活血利水方对糖尿病视网膜病变有较好的临床疗效,可以在临床中推广应用。