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目的: 1.研究Myocardin诱导的子宫平滑肌细胞分化标志基因的表达； 2.研究 ERα促进子宫平滑肌细胞的增值作用； 3.研究 ERα所抑制的 myocardin诱导的子宫平滑肌细胞分化标志基因的转录激活和表达； 4.研究ERα和myocardin之间的蛋白蛋白相互作用。 方法: 1.建立SD大鼠子宫肌瘤模型。 2. SD大鼠子宫肌瘤模型建立后分别取实验组和对照组子宫平滑肌组织,利用免疫组织化学、RT-PCR、western bloting实验方法检测Myocardin、平滑肌分化标志基因SM22α、ERα、平滑肌增值标志基因PCNA在SD大鼠正常子宫平滑肌和子宫肌瘤组织的表达。 3.原代细胞培养(SD大鼠原代子宫肌瘤细胞、正常子宫平滑肌细胞),检测SM22-LUC、SM22 mut-LUC、SM22 Emut-LUC的荧光素酶活性和子宫平滑肌细胞分化与增殖marker的表达。 4.在COS-7细胞培养中,Co-IP检测myocardin和ERα之间的蛋白蛋白相互作用。 结果: 1.肉眼观察和HE染色验证了SD大鼠子宫肌瘤模型。 2. RT-PCR、免疫组化、western bloting检测结果,SM22α和Myocardin的表达正常子宫平滑肌组织中比子宫肌瘤组织中的表达量高。可是 PCNA、ERα的表达在子宫肌瘤组织中比正常子宫平滑肌组织中含量高。 3.原代细胞中LUC结果显示myocardin驱动SM22 Luciferease的活性,而ERα抑制myocardin驱动的SM22 Luciferease的转录活性。 4. Co-IP证实ERα和myocardin之间蛋白蛋白形成复合物。 结论: 1. Myocardin通过与CArG-box结合激活下游分化基因SM22α的转录和蛋白表达。 2. ERα抑制myocardin对SM22α的转录和表达,进而抑制子宫平滑肌细胞的分化,促进增殖。 3. myocardin与ERα之间形成复合物;进而可能影响Myocardin-SRF与CArG-box结合,抑制其驱动的子宫平滑肌细胞的分化作用;最终可能促进子宫肌瘤的发生发展。