【摘 要】
:
目的:研究蜂毒素对人膀胱癌T24细胞P16基因表达及甲基化的影响,并探讨其可能的机制。
方法:人膀胱癌T24细胞体外培养,用MTT法检测不同蜂毒素浓度(0、1、2、4、8、16和
论文部分内容阅读
目的:研究蜂毒素对人膀胱癌T24细胞P16基因表达及甲基化的影响,并探讨其可能的机制。
方法:人膀胱癌T24细胞体外培养,用MTT法检测不同蜂毒素浓度(0、1、2、4、8、16和32μg/mL)处理(24h和48h)后其增殖变化,倒置显微镜观察形态学变化。流式细胞仪检测细胞周期。RT-PCR检测蜂毒素对T24细胞P16的mRNA的表达变化。Western blotting检测蜂毒素对T24细胞P16的蛋白表达变化 (6)甲基化特异性
PCR(MSP)法检测蜂毒素对T24细胞P16基因5’端启动子区CpG岛甲基化的状态。结果:使用4、8、16μg/mL蜂毒素处理人膀胱癌T24细胞24h及48h,蜂毒素能显著抑制T24细胞的增殖,呈现剂量依赖性,但是随着时间的延长,抑制效应无明显增强。倒置显微镜观察发现T24细胞密度呈剂量性减低,部分细胞出现漂浮,并可以观察到细胞凋亡的形态学改变。用流式细胞术检测细胞周期观察到蜂毒素将T24细胞阻滞在S期,呈现剂量依赖性。采用4、8、16μg/mL蜂毒素作用于人膀胱癌T24细胞24h ,RT-PCR检测P16的mRNA的表达逐渐增加,呈现剂量依赖性。采用4、8、16μg/mL蜂毒素作用于人膀胱癌T24细胞24h ,用Western blotting检测P16 的蛋白表达量逐渐增加,呈现剂量依赖性。采用4、8、16μg/mL蜂毒素作用于人膀胱癌T24细胞24h,用MSP检测P16基因5’端启动子区CpG岛甲基化的状态,蜂毒素具有去甲基化作用,呈现剂量依赖性。
结论:蜂毒素能够抑制人膀胱癌T24细胞增殖,且呈剂量依赖性。蜂毒素能使P16的表达升高,且呈剂量依赖性。人膀胱癌T24细胞中P16基因5’端启动子区CpG岛呈部分甲基化状态。P16基因在人膀胱癌发生发展过程中可能是一种重要的分子调控机制。蜂毒素作为去甲基化药物,能够诱导因启动子区CpG岛甲基化而表达减弱或沉默的P16基因重新表达。
其他文献
近十多年来,苏联露天矿山的开采比重迅速提高,开采深度不断增加,采场的大气污染问题也日益严重。据苏联一些深凹露天矿统计,由于采场大气污染每年被迫停产的时间达30余天,占
目的: 放射治疗对于无手术指征的局部晚期及局部复发的非小细胞肺癌(NSCLC)患者是一种非常重要的治疗手段,放射敏感性是影响放疗疗效的主要生物学因素。但不同个体之间存在
由中国作协、吉林森工集团董事长主席柏广新主编,吉林森工集团监察部部长顾有生策划并组织实施的大型图画册《画说廉洁》,由吉林美术出版社出版发
By the Chinese Writers A
The Seventh International Symposiumon Neural Networks (ISNN2010) will be held in Shanghai, following the suc-cesses of previous events. Shanghai is the largest
目的:通过比较钙网蛋白(Calreticulin, CRT)与Caspase-3在正常早期妊娠妇女和早期自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达,初步探讨CRT与Caspase-3在早期自然流产发生、发展
目的:构建TGF-β应答元件真核表达载体pGLuc-TRE-Mini-TK,BMP应答元件真核表达载体GLuc-(BRE)2-Mini-TK和pGLuc-9×(GCCG)-Mini-TK,为实现筛选与纤维化密切相关的转录因子
在综合机械化采煤过程中,准确地查明采掘前方和采煤工作面的地质构造,有着十分重要的意义.七十年代以来,一些主要产煤国家相继开展了矿井小构造的各种探测工作,获得了较大的
摆在我们面前的,是60年前新中国刚刚诞生的时候,开国领袖毛泽东的长子毛岸英写给亲戚的一封信。这是一封平常的信,但它的内容却极不平常。它集中表现了共产党人大公无私、执
目的:1、评价降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)是否参与缺血心肌的保护作用,通过观察其对再灌注后心脏功能和心脏梗死面积的影响;2、通过对培养的心
锑精矿含砷要求低于1.0%。据国内11个矿山锑矿产品调查,有7个矿山的锑精矿(占63%)含砷超过1%,有的高达4%,产品不合格,销售困难,乃至停产。锑精矿含砷高,导致冶炼碱耗高,周期长,