目的：研究蜂毒素对人膀胱癌T24细胞P16基因表达及甲基化的影响,并探讨其可能的机制。 　　方法：人膀胱癌T24细胞体外培养,用MTT法检测不同蜂毒素浓度(0、1、2、4、8、16和32μg/mL)处理(24h和48h)后其增殖变化,倒置显微镜观察形态学变化。流式细胞仪检测细胞周期。RT-PCR检测蜂毒素对T24细胞P16的mRNA的表达变化。Western blotting检测蜂毒素对T24细胞P16的蛋白表达变化 (6)甲基化特异性 　　PCR(MSP)法检测蜂毒素对T24细胞P16基因5’端启动子区CpG岛甲基化的状态。结果：使用4、8、16μg/mL蜂毒素处理人膀胱癌T24细胞24h及48h,蜂毒素能显著抑制T24细胞的增殖,呈现剂量依赖性,但是随着时间的延长,抑制效应无明显增强。倒置显微镜观察发现T24细胞密度呈剂量性减低,部分细胞出现漂浮,并可以观察到细胞凋亡的形态学改变。用流式细胞术检测细胞周期观察到蜂毒素将T24细胞阻滞在S期,呈现剂量依赖性。采用4、8、16μg/mL蜂毒素作用于人膀胱癌T24细胞24h ,RT-PCR检测P16的mRNA的表达逐渐增加,呈现剂量依赖性。采用4、8、16μg/mL蜂毒素作用于人膀胱癌T24细胞24h ,用Western blotting检测P16 的蛋白表达量逐渐增加,呈现剂量依赖性。采用4、8、16μg/mL蜂毒素作用于人膀胱癌T24细胞24h,用MSP检测P16基因5’端启动子区CpG岛甲基化的状态,蜂毒素具有去甲基化作用,呈现剂量依赖性。 　　结论：蜂毒素能够抑制人膀胱癌T24细胞增殖,且呈剂量依赖性。蜂毒素能使P16的表达升高,且呈剂量依赖性。人膀胱癌T24细胞中P16基因5’端启动子区CpG岛呈部分甲基化状态。P16基因在人膀胱癌发生发展过程中可能是一种重要的分子调控机制。蜂毒素作为去甲基化药物,能够诱导因启动子区CpG岛甲基化而表达减弱或沉默的P16基因重新表达。