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目的：建立一种快速、准确、灵敏的测定血清中维生素K：；(VK3)的电化学方法,确定血清中VK：3的医学参考值范围；合成纳米银并以4-叔丁基-1-(乙氧基羰基甲氧基)硫杯[4]芳烃(4-tert-Butyl-1(Ethoxycarbonylmethoxy) Thiacalix[4]Arene; TAC)修饰的玻碳电极为工作电极测定纳米银溶出Ag+的含量。方法：1、VK3的检测方法：镀汞膜修饰玻碳电极为工作电极,Ag/AgCl电极为参比电极,铂片电极为辅助电极,组成三电极体系,在pH=1.0、浓度为1.0mol·L-1氨水-氯化铵缓冲液的底液中,用差分脉冲溶出伏安法对血清中VK3；进行测定；2、纳米银颗粒溶出Ag+的检测方法：采用二次还原法制备纳米银颗粒；TAC修饰玻碳电极为工作电极,饱和甘汞电极为参比电极,铂片电极为辅助电极,组成三电极体系,在pH4.5的B-R buffer底液中,用差分脉冲溶出伏安法对纳米银颗粒溶出Ag’进行测定。结果：1、峰电流(i p)与VK3的浓度(C)在0.23-1.6ng·mL-1范围内呈现良好的线性关系,检出限为0.23ng·mL-1,并具有很好的平行性,对于0.92ng·mL的VK3,6次平行测定结果的标准偏差RSD为1.64%。应用此方法对血清中VK：3含量进行了测定,方法的平均回收率为99.91%,RSD为1.03%；在方案的实施过程中,天津市南开医院和天津市人民医院两个中心分别完成158例和162例,年龄组例数分布均衡,差异无统计学意义,达到临床试验方案设计要求；LK2006电化学工作站的检测结果的95%医学参考值范围为0.1-1.2ng·mL-12、采用二次还原法制备了的纳米银颗粒粒度分布均匀、颗粒小,没有明显团聚；峰电流(ip)与Ag+的浓度(C)在2.5-40ng·mL-1范围内呈现良好的线性关系,对于20ng·mL-1的AgNO3,标准品的6次平行测定结果的标准偏差RSD为1.02,重现性良好。结论：1、差分脉冲溶出伏安法与高效液相色谱法(HPLC)相比测定VK3简单、快速、灵敏度高,可作为血清中VK3的高敏检测方法；2、由于差分脉冲溶出伏安法灵敏度高,加之经过含硫杯芳烃修饰的电极选择性好等特点,所开发方法可作为游离Ag+的高灵敏检测方法,适用于评价纳米银颗粒的稳定性和Ag+的溶出率,对于开发优质抗菌纳米银材料有指导意义。