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细小炭角菌[(Xylaria gracillima)(Fr.)Fr.]是土白蚁巢群衰亡后生长出的一种珍贵的药用真菌。属于子囊菌亚门Ascomycotina,炭角菌目Xylariales,炭角菌科Xylariaceae,炭角菌属Xylaria。文献报道细小炭角菌子实体提取物与其它中药材制成的复合胶囊,具有很好的抗癌活性。同时还有增进食欲、恢复体力、护肝和调节内分泌的作用。
本研究首次对细小炭角菌进行了液体发酵培养,并且对液体培养条件进行了优化,得到能使菌丝体和胞外多糖高产的培养基。通过单因素实验及SAS统计软件进行实验设计与分析,得到菌丝最佳培养条件为麦芽糊精5%,蛋白胨2%,酵母膏0.5%,硫酸镁0.1%。胞外多糖高产的最佳培养条件为:麦芽糖6%,蛋白胨2%,酵母膏1%,氯化钙0.1%。
本研究首次对细小炭角菌发酵液中胞外多糖的提取工艺进行了研究,得出适合胞外多糖提取的最佳条件为浓缩发酵液到原体积的1/8,加95%乙醇到终浓度为85%,4℃静置18个小时。并且通过比较研究两种常用的测定多糖的方法,发现用蒽酮-硫酸法测定细小炭角菌胞外多糖优于苯酚-硫酸法。建立了多糖纯化测定的系列方法,通过柱色谱纯化得到两种初步纯化的多糖。
首次对细小炭角菌代谢产物进行了抗氧化活性研究,实验结果表明细小炭角菌具有很好的抗氧化作用;通过抗肿瘤细胞实验结果显示,细小炭角菌发酵菌丝体具有较强的抗肝肿瘤细胞活性。
本研究为细小炭角菌的深入研究提供了科学依据及参考资料,为实验室食药用真菌的生物活性成分的提取、分析测定和抗氧化、抗肿瘤研究建立了操作简便、稳定可靠的一套方法。